核酸适配体封盖的介孔二氧化硅纳米颗粒用于肌红蛋白的检测.pdfVIP

Ｖｏｌ．３８ 高等 学校 化 学 学报 Ｎｏ．２ ２０１７年２月 　 　 　 　 　 　 ＣＨＥＭＩＣＡＬＪＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＣＨＩＮＥＳＥ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＩＥＳ　 　 　 　 　 　 １８７～１９２ ｄｏｉ：１０．７５０３／ ｃｊｃ 　 　 核酸适配体封盖的介孔二氧化硅 纳米颗粒用于肌红蛋白的检测 高　 蕾，王　 青，羊小海，王柯敏，邓　 鹏，张　 华，李志平 （湖南大学化学生物传感与计量学国家重点实验室，化学化工学院， 生物纳米与分子工程湖南省重点实验室，长沙４１００８２） 摘要　 利用核酸适配体封盖的介孔二氧化硅纳米颗粒构建了一种新型、简便及免标记的肌红蛋白定量检测 方法． 首先，用肌红蛋白核酸适配体将荧光小分子罗丹明６Ｇ封盖在介孔颗粒内， 当存在目标物肌红蛋白 时，由于介孔颗粒上的核酸适配体可特异性结合肌红蛋白而脱离介孔颗粒表面，进而释放介孔颗粒内的罗 丹明６Ｇ，使溶液荧光强度增强． 实验结果表明，荧光强度与肌红蛋白的浓度呈正相关，通过荧光强度的变化 可实现对肌红蛋白的定量检测． 该方法的检出限低至 １１ ｎｍｏｌ／ Ｌ，且选择性好，可满足临床医学的检测 要求．　 　 　 关键词　 核酸适配体；肌红蛋白；介孔二氧化硅纳米颗粒 中图分类号　 Ｏ６５７　 　 　 　 文献标志码　 Ａ　 　 　 　 ［１～３］ 肌红蛋白（Ｍｙｏｇｌｏｂｉｎ，Ｍｙｏ）作为一种小分子蛋白，在肌细胞内起到转运和贮存氧的功能 ． 当心 肌或者骨骼肌受损时肌红蛋白最先从受损细胞释放到血液中，血液中肌红蛋白的含量明显升高， 因 ［４～６］ ［７］ 此可作为急性心肌梗死早期诊断的标志物 ． 目前，检测肌红蛋白的方法主要有质谱法 、 电 ［８～１０］ ［１１］ ［１２］ ［１３］ 化学法 、荧光法 、表面等离子体共振法 和比色法 等，这些方法大多是基于抗体抗原的 ［１４］ 相互识别构建的检测体系，因此，难以避免因引入抗体所导致的成本高、易受外界因素影响等不足 ． 核酸适配体具有高特异性、高亲和力、低成本、易合成、易修饰和稳点性好等特点，被广泛用于传感器 ［１５～２３］ ［２４］ 的构建 ． 本课题组利用微流控芯片技术筛选得到了特异性识别肌红蛋白的核酸适配体 ，并利 ［２４～２６］ ［２７］ 用该核酸适配体构建了一系列生物传感技术用于肌红蛋白的检测，如电化学法 、 比色法 和荧 ［２８］ 光法 等． 在这些方法中，有的需要进行复杂的化学修饰和组装步骤，操作较为繁琐；有的需要引入 抗体或者核酶，价格昂贵且易受外界因素影响． 因此，有必要发展一种简便灵敏的新方法用于肌红蛋 白的检测． 本文以核酸适配体为“门控分子”将“客体分子”罗丹明６Ｇ封盖在介孔二氧化硅纳米颗粒（ＭＳＮ） 中，肌红蛋白可与颗粒表面的核酸适配体结合而使核酸适配体脱离颗粒表面，并释放罗丹明６Ｇ，据此 构建了一种简便、免标记的检测肌红蛋白的新方法． １　 实验部