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植物中粗脂肪的测定 脂肪是各种脂肪酸的甘油三酸脂，植物中脂肪是各种甘油三酸脂的混合物。 虽然各种脂肪酸的不饱和性，碳链长短以及结构等不相同，但其共同点是不溶于 水而易溶于许多有机溶剂中。因此可用有机溶剂(乙醚沸点34.5℃或石油醚沸程 为30—60℃等)。用试样的失重(残余法)来测定脂肪含量。浸提时除脂肪外还包括 一些类脂如脂肪酸、磷脂，糖脂以及脂溶性色素和维生素等，故称为“粗脂肪”。 本实验除了介绍谷物、油料作物种子(1983)和饲料(1987)中粗脂肪测定的国家标准 油重法(使用索氏浸提器)外，还介绍了适用于大批样同时测定的残余法。 1 油重法(索氏提取法) 原理： 油重法的原理是将样品置于索氏脂肪抽提器中，反复经乙醚(或石油醚)抽提， 使脂肪完全溶解于溶剂中，然后加热除去溶剂，称重，即可算出样品中粗脂肪百 分含量。由于样品中类脂物质亦溶解于此溶剂中，故称粗脂肪含量，也是国际标 准推荐法，仲裁时以此油重法为准。本法所得结果准确、稳定，其缺点是费时， 一般须10小时以上，而且一套仪器只能测定一个样品，不适于大批样品的分析。 主要仪器： (1)分析天平：感量0.0001g (2)粉碎机、研钵、切片机 (3)电热式恒温水浴：(6或8孔式)。 (4)烘箱。 -1- (5)滤纸筒：直径22mm,长100mm。 (6)装有变色硅胶的干燥器。 。 试剂 ： 无水乙醚：化学纯。 操作步骤： (1)样品的选取和制备：选取有代表性的油料种子，拣出杂质，按四分法缩减 取样。小粒种子，如芝麻、油菜等，取样量不得少于25g；大粒种子如大豆、花 生仁等，取样量不得少于30g。大豆经105±2℃烘干1小时后取出，放入干燥器 内冷却至室温。粉碎，并通过40 目筛；花生仁切碎。带壳油料种子，如花生果， 蓖麻籽，向日葵籽等，需将壳与籽粒分开，分别称量，计算出仁率。然后测定籽 粒的油分。制备完毕，立即混合均匀，装入磨口瓶中备用。 (2)研磨与称样：称取备用样品2—4g两份，(含油0.7—1.0g)，准确至0.001g。 置105±2℃烘箱中干燥1小时，取出，放入干燥器内冷却至室温。同时测试样的 水分。将试样在研钵内研细，必要时加适量纯石英砂研磨，用牛角勺将研细的试 样移入已干燥的滤纸筒，取少量脱脂棉蘸乙醚擦净研钵、研杆和牛角勺上的样品 和油迹，一并投入滤纸筒内(大豆已预先烘干粉碎可直接称样装筒)，在试样面层 塞以脱脂棉，以防样品损失，将滤纸筒投入抽提管内。每个抽提器只放一个单样。 (3)在装有2—3粒沸石并已烘至恒重的洁净的抽提瓶内，加入约瓶体积1/2 的无水乙醚，把抽提器各部分连接起来，连接好冷凝水流，调节水浴温度，使冷 凝下滴的乙醚速度 180滴/分(水浴温度约在55℃以下，(注)一般条件下只用 45—50℃，120滴/分比较安全。)，谷物、大豆样品抽提8小时，一般油料抽提 -2- 10小时，有些含油量很高的油料种子，应延长抽提时间，直到抽提管内的乙醚 用滤纸试验无油迹时为止。 (4)抽提完毕后，从抽提管中取出滤纸筒，再连接好抽提器，在水浴上蒸馏回 收抽取瓶中的乙醚。然后取出抽提瓶，在沸水浴上蒸去残余的乙醚。 (5)将盛有粗脂肪的抽提瓶放入105±2℃烘箱中烘干1小时，放入干燥器中冷 却至室温(约45—60分钟)后称重，准确至0.0001g，再烘30分钟，冷却、称重， 直至恒重。抽提瓶增加的重量即为粗脂肪的重量。抽出的油应是清亮的，否则应 重做。 结果计算： 粗脂肪%(干基)=粗脂肪重(g)/试样重(g)×100 带壳的油料种子粗脂肪%=子仁粗脂肪×出仁率% 平行测定的结果用算术平均值表示，保留小数点后两位。平行测定结果的相 对误差。大豆不得大于2%，油料作物种子不得大于1% 2 残余法 原理 残余法是基于样品经溶剂反复抽提后，使全部脂肪除去，再从样品剩余的残 渣量计算出粗脂肪含量。 主要仪器 (1)索氏型脂肪抽提器。 (2)样品筛：20 目、40 目各一个。 -3- (3)称样瓶：直径3.5cm，高7cm。 (4)培养皿：直径11—13cm。 (5)滤纸：中速或慢速。 (6)乳胶手套