共聚焦激光扫描显微术.pptxVIP

共聚焦激光扫描显微术及其在生物医学中的应用;一、概述;简史: 马文.闵斯基 (Marvin Minsky) 1957 （美国专利） 矛 盾：成像质量、扫描速度 狭缝扫描:成像质量不佳 台阶扫描:光栏不动，移动工作台标本 光束扫描：现通用;二、基本原理;2.成像保存 以电信号形式储存， 可以进行图象分析（参数、伪彩、值等）。 3.共轭(confocal) 是指光源孔和检测针孔对物镜焦平面是共轭的。;宽场照明显微镜和共聚焦图象比较;三、CLSM的应用;;;图象处理功能 1.光学切片功能：显微CT 微动进步马达最小步距0.1um 2.三维图象重建：3D软件 X，Y，Z轴重建，立体旋转 ; 3.荧光物质的定位，定量与动态测量（单标、双标、多重标记） ;;;;高速采集;FRAP光漂白;Tubulin;Actin;4.细胞内PH及Ca,Na等离子定位、双标记组合、OD值与免疫细胞组化、原位杂交技术相结合; ;细胞生物学功能 1.粘附细胞的分选：物理化学特性，细胞亚群 2.激光细胞显微外科及光陷阱(optical trap)技术： 激光刀：细胞穿孔、灼烧细胞器、切割染色体、切除神经细胞突起 光陷阱：利用激光的增强效应，钳制或移动细胞器、染色体，进行