《妇科感染常见病原菌及检测方法》.ppt

阴道毛滴虫 阴道的致病性厌氧寄生原虫，虫体为 8-45μm，呈梨形或椭圆形，无色透明，大小为白细胞的2-3倍。 毛滴虫性阴道炎的实验室诊断 1. pH 4.5 2. 盐水湿片 3.快速抗原检查 4. DNA杂交探针 5. 培养 6. 核酸扩增实验 盐水湿片 革兰染色 快速抗原检查 检测阴道毛滴虫特定的抗原 已有商品化试剂 最优试验条件并不需要活的微生物 培养 核酸扩增试验 APTIMA Trichomonas vaginalis (ATV) test（Gen-Probe, Inc. San Diego, CA）是近期FDA 批准的检查，既可用于女性TV 的筛检，也可用于诊断。 可以使用多种标本类型。 一些实验室也可通过比对，验证自己的PCR方法。 病例二 患者，女性，40岁，已婚，阴道分泌物增多，伴腰酸，偶有性生活后出血2年。检查外阴正常，宫颈肥大，Ⅲ度糜烂，接触性出血。 考虑什么病？进一步做什么检查？ 子宫颈炎 子宫颈可因各种致病因素的侵袭而发生炎症，有急性和慢性两种。 疾病 致病菌 急性宫颈炎 沙眼衣原体、淋病奈瑟菌 慢性宫颈炎 性传播病原体：沙眼衣原体、淋病奈瑟菌、单纯疱疹病毒 内源性病原体：葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌等； 部分与引起阴道炎的病原菌相同 尿道炎 是指尿道黏膜的炎症 。多为致病菌逆行侵入尿道引起。 疾病 致病菌 淋病性尿道炎 淋病奈瑟菌 非淋病性尿道炎 沙眼衣原体、解脲支原体、阴道毛滴虫、嗜血短杆菌、单纯疱疹病毒最常见 非特异性尿道炎 大肠埃希杆菌、链球菌属及葡萄球菌属 尿道炎/宫颈炎相关病原实验室检查 常见病原因子 诊断方法 最优标本 转运要求及最佳时间 沙眼衣原体 核酸扩增实验 尿液、宫颈内、阴道和/或尿道拭子（直肠、咽部、结膜、液基细胞学标本） 实验室提供转运装置， 室温， 2d 杂交探针 宫颈内或尿道拭子 实验室提供转运装置， 室温， 2d 培养 宫颈内、尿道、结膜、 NP、咽、直肠拭子 实验室提供转运装置， 4℃冷藏； 2h 直接免疫荧光染色 结膜拭子 转运培养基，室温，2h 淋病奈瑟菌 革兰染色 尿道分泌物 直接涂片或将拭子置于转运培养基，室温，立即 核酸扩增实验 尿液、宫颈内、阴道和/或尿道拭子（直肠、咽部、结膜、液基细胞学标本） 实验室提供转运装置， 室温， 2d 杂交探针 宫颈内或尿道拭子 实验室提供转运装置， 室温， 2d 培养 宫颈内、尿道、结膜、 NP、咽、直肠拭子 转运培养基， 室温， ≤ 1h，不要冷藏 标本 尿道炎/宫颈炎相关病原实验室检查 常见病原因子 诊断实验 最优标本 转运要求及最佳时间 阴道毛滴虫 盐水湿片 宫颈内或尿道拭子 置于0.5mL盐水， 30min-2h 快速抗原检查 宫颈内拭子 实验室提供转运装置， 室温， 24h 杂交探针 宫颈内或阴道拭子 实验室提供转运装置， 室温， 7d 培养 宫颈内或尿道拭子 直接接种在InPouch TV培养系统，2-5d 核酸扩增实验 阴道、宫颈内拭子，尿，液基细胞学标本，尿道、直肠、咽部拭子 实验室提供转运装置， 室温， 2d HSV 直接免疫荧光染色 病变基底部刮取 床边制片，室温，24h 培养 病变基底部刮取 置于VTM/UTM，室温或置于冰上，2h 核酸扩增实验 病变基底部刮取或分泌物拭子 实验室提供转运装置 病例二 患者，女性，40岁，已婚，阴道分泌物增多，伴腰酸，偶有性生活后出血2年。检查外阴正常，宫颈肥大，Ⅲ度糜烂，接触性出血。 医生：根据临床表现初步诊断为宫颈炎。取宫颈内拭子，嘱病人立即送检（注意保温），以明确感染病原体。 淋病奈瑟菌 革兰染色 为革兰阴性双球菌，似肾形或咖啡豆状，常成双排列，凹面相对。 急性淋病患者的淋球菌常被吞噬于中性粒细胞内；慢性淋病患者的淋球菌多分布在细胞外。 简便、快速，可做出初步诊断。仅对男性患者进行涂片革兰染色。 淋病奈瑟菌 细胞内革兰阴性双球菌 ——对GC 特异性达95％ 细胞外革兰阴性双球菌 ——对GC 特异性达10-29％ 培养 诊断淋病的重要手段 接种到选择培养基，置于36℃、含5-10% CO2 ，湿润环境中培养。 如果床边直接接种标本到选择培养基，加CO2 药片形成气体环境，培养敏感性会更好。 培养 初代培养生长缓慢，24小时后可形成灰色/湿润、半透明的小菌落（直径0.5-1mm）。 氧化酶阳性、触酶阳性、葡萄糖产酸试验阳性且仅分解利用葡萄糖。 图片by陈东科 核酸扩增试验 已有商品化试剂盒。 优点是快速、准确，缺点是试验设备要求高。 淋病奈瑟菌DNA 在感染