陆道培医院集团童春容主任关于急性白血病诊断和分型科普介绍.pptx

急性白血病的诊断与分型陆道培血液.肿瘤中心童春容正常血液/免疫细胞发育过程造血干细胞淋巴系祖细胞髓系祖细胞红系/巨核系祖细胞粒/单系祖细胞单核/树突祖细胞早幼粒细胞原始红细胞原始巨核细胞原始T细胞原始B细胞单核细胞树突细胞嗜酸粒细胞嗜中粒细胞嗜碱粒细胞红细胞血小板T细胞B细胞浆细胞白血病的定义 白血病是一组造血干/祖细胞恶变导致分化阻滞、凋亡障碍的异质性恶性肿瘤性疾病。绝大多数表现为骨髓(BM)和/或血液(PB)中的恶性造血系统或免疫系统细胞增加。 急性白血病为原始恶性造血细胞明显增加的疾病。一般表现为乏力、面色苍白等贫血症状，出血，发热等感染症状，白血病细胞浸润导致多部位肿块、肿胀等症状；起病快，从发病到就诊一般数天至一个月 造血干/祖细胞恶变还可导致恶性淋巴瘤、多发性骨髓瘤(MM)、骨髓增殖性肿瘤(MPN)、骨髓增生异常综合征(MDS), 这些疾病有时候难以和白血病鉴别，有些淋巴瘤、MPN、MDS和白血病仅仅是数量的差异，其疾病性质相似。如淋巴母细胞淋巴瘤和急性淋巴细胞白血病的差异主要是后者骨髓或血液恶性原始淋巴细胞?25%，其治疗原则和方案一致。 世界卫生组织将造血干/祖细胞恶性肿瘤统一进行分类（见附表）。白血病分型的发展历史 FAB分型: 1976年首次提出，1980、81、85、91年逐步完善。以细胞形态学及细胞化学染色AML: M0、M1、M2、M3、M4、M5、M6、M7 ALL: L1、L2、L33 WHO分型: 1995年开始，分别于2001、2004、2008年修订 。联合细胞形态、细胞化学、免疫学、染色体、FISH 、基因、组织病理及免疫组化急性白血病诊断的要求 全面正确诊断与分型 评估预后 确立检测MRD的标志，追踪MRD 指导个性化治疗： 了解危险分层； 发现靶向治疗标记； 发现抗原丢失、克隆演变或突变 帮助确定病因或发病机制MICM整合诊断技术 M: 形态学、细胞化学、病理 I: 免疫学，包括免疫组化、流式细胞分析 C: 染色体、荧光标记探针的原位杂交(FISH) M: 分子生物学：白血病融合基因、基因突变、克隆性基因重排、正常基因表达水平过高诊断与分型 形态或加细胞化学分析受观察者个体经验及分辨力的限制，一致率仅50-70%；病理对及免疫组化对诊断伴骨纤的患者具有重要价值 在此基础上增加免疫组化和/或FCM分析大大增加了分型的准确率，可达90%以上； 染色体、FISH及基因分析，进一步提高分型的准确率细胞形态及细胞化学分析的优缺点 直观：直接观察细胞形态，对MDS的诊断、一些少见的、大的恶性细胞的确定优于FCM 细胞一般是第一针标本，很少稀释，几乎未处理，因此恶性细胞的比例更准确 经济、快速 人为因素影响大：仅根据形态学诊断急性白血病，FAB专家的一致率仅50-70% 难以鉴别细胞的成熟阶段，B、T等系列的恶性细胞 细胞较成熟时，难以鉴别良恶性 预后价值不太大树脂切片：红系增生活跃，原早（部分细胞体积偏大）阶段细胞可见小堆，中晚阶段细胞可见小片状分布。 Gomori：++++石蜡切片IHC: CD61染色提示小巨核细胞异常增生，且存在聚集现象（MDS特征性改变之一）。CD235a染色提示红系成片状增生 MDS伴骨髓纤维化病理及免疫组织化学的优缺点 标本直接固定，不容易损失信息，恶性细胞比例更客观，对一些抽不出或少见细胞，仍可诊断。如伴骨髓纤维化、MM、淋巴瘤、转移癌、组织细胞、巨噬细胞、树突细胞、何杰金细胞等 可以直接观察到组织结构，容易确定恶性细胞的组织部位 诊断慢、受诊断者个人经验及知识水平影响大 对一些组织结构无破坏、细胞形态改变不大的细胞，难以鉴定良恶性及成熟度 有些恶性细胞在液体中，难以获取组织标本，难以判断组织结构FCM的工作原理摘自 Flow Cytometry: First PrincipleFCM检测的参数 FSC: 细胞大小 SSC:细胞内颗粒多少及细胞内构造的复杂性 FL：3-10多种正常BM细胞的图形：SSC按对数收集病例二(本院）FCM 的优缺点 一次可检测数万至数十万个细胞上的数十种标记，可同时检测每个细胞的六个以上参数，敏感性高，分析全面 更容易区分良恶性，恶性细胞的系列及成熟度 可帮助确定免疫治疗的靶点并监测疗效，如CD20、CD19、MHC分子等。是监测MRD覆盖面最广的方法。 快速、简便、重复性好 不能确定组织结构，一些罕见的大细胞不能分析到，一些细胞粘附性高，难以抽出。因此对HL等难以确诊。 染色、洗涤等细胞处理中会损失一些细胞，尤其是DLBCL、幼稚红细胞，因此有时判断恶性细胞的比例不如形态准确，对M6、MDS的诊断不如形态 预后价值不如染色体和基因染色体的优缺点 可以发现很多未知基因的染色体异常 有独立的诊断及预后价值 诊断时间长 高度依赖诊断人员