生物化学—— 蛋白质.pptxVIP

第一章 蛋 白 质;第一节 蛋白质的生物学意义 ;体现两点： 1、蛋白质是构成原生质的重要组成之一； 2、是生物体赖以生存的物质基础，是生物体内一切生理机能的体现者。;蛋白质分布广泛、功能多样;1、元素的组成： C、H、O、N、S等 N的含量一般为16% 凯氏定氮法测定蛋白质的含量： 蛋白质含量=蛋白氮×6.25 （ 6.25=1/16%） 2、组成单位——氨基酸; 第三节 蛋白质的氨基酸组成;一、蛋白质的组成单位——氨基酸;A、地球上天然形成的氨基酸有300 种以上，但是 构成蛋白质的氨基酸只有20种, 除了脯氨酸外，都是α-氨基酸。 什么是α-氨基酸？ ----C-C-C-C-COOH γβα ----C-C-C-C(NH2)-COOH α-氨基酸 ----C-C-C (NH2)- C - COOH β-氨基酸 ----C-C (NH2)- C- C - COOH γ-氨基酸;除脯氨酸外，其他均具有如下结构通式。 ;B、除了甘氨酸外，其他均具有不对称碳原子，具有旋光性，比旋光度是氨基酸的重要物理常数之一，是鉴别各种氨基酸的重要依据。 C、从蛋白质水解得到的α-氨基酸均为 L-型氨基酸 ;2、分类;（一）极性氨基酸 酸性氨基酸：含两个羧基，带负电荷 碱性氨基酸：含两个碱基，带正电荷 中性氨基酸：一氨基一羧基氨基酸 （二）非极性氨基酸;氨基酸分类（根据R性质） （1）脂肪族氨基酸 （2）芳香族氨基酸 （3）杂环氨基酸 （4）杂环亚氨基酸; ; ; ; ; ; ; ; ;精氨酸 Argini 赖氨酸 Lysine 组氨酸 Histidine ;精氨酸 Arginine 赖氨酸 Lysine 组氨酸 Histidine;精氨酸 Arginine 赖氨酸 Lysine 组氨酸 Histidine;天冬氨酸 Aspartate 谷氨酸 Glutamate;天冬氨酸 Aspartate 谷氨酸 Glutamate; ; ; ; ; ; ;二、氨基酸的理化性质;构成蛋白质的20种氨基酸在可见光区都没有光吸收，但在远紫外区(220nm)均有光吸收。 在近紫外区(220-300nm)只有Tyr、Phe和Trp有吸收光的能力。 Tyr的?max＝275nm，Phe的?max＝257nm，Trp的?max＝280nm。 平均?max＝280nm;2、两性解离和等电点;纯晶体状态;C;氨基酸是个两性电解质，既可进行酸解离也可进行碱解离，氨基酸在水溶液中就可??带+电或-电，以及呈电中性，由溶液的pH值来决定。;氨基酸的等电点;侧链不含解离基团的中性氨基酸，其等电点是它的pK1和pK2的平均值： pI = (pK1 + pK2 )/2 甘氨酸：（pK1=2.34） 一羧基 （pK2=9.60） 一氨基 pI=(pK1+pK2)/2=5.97 ;对于侧链含有可解离基团的氨基酸，其pI值也决定于两性离子两边的pK值的平均值。 酸性氨基酸：pI = (pK1 + pK2 )/2 谷氨酸（二羧基一氨基） 碱性氨基酸：pI = (pK2 + pK3 )/2 赖氨酸（一羧基二氨基） ;答案：;等电点的应用 ;3、氨基酸的化学反应; ;; 所有的游离α—氨基酸都有此反应，并产生蓝紫色物质，但脯氨酸与茚三酮反应产生的为黄色物质。因为它们是亚氨基酸，反应不释放NH3，而直接生成黄色物质。 应用： 比色分析（定量氨基酸） 、显色剂 、气体分析法 ; ; 1953年，Sanger大量使用该反应测定了牛胰岛素的一级结构(51个氨基酸)，所以该反应也称Sanger反应。 近年来测定N-端氨基酸，广泛使用5-二甲氨基萘磺酰氯。反应生成物5-二甲氨基萘磺酰氨基酸有强烈的荧光。可用荧光光度计快速测定出来。而且灵敏度极高。 ;与异硫氰酸苯酯（PITC）的反应 ;（3） Edman反应 与异硫氰酸苯酯（PITC）的反应 ;（3） Edman反应;肽:一个氨基酸的α-羧基和另一氨基酸的α-氨基脱水后形成的化合物叫做肽 两个氨基酸形成的肽为二肽,二肽还有α-羧基与α-氨基，还可以继续与