病毒感染的检查方法与防治原则-精选课件(公开).pptVIP

2．病毒的形态学检查 取含有病毒的组织细胞，经染色后用光学显微镜观察病毒包涵体及细胞病变。 电镜和免疫电镜 普通光学显微镜：包涵体 5.病毒核酸的检测： (1)病毒核酸杂交技术 是一种特异、快速、能定量分型、应用面广的诊断新技术 利用核苷酸可在体外一定条件下解离、重组的特性，将一条已知的单链DNA或RNA用同位素或非放射性核素标记后作为探针，根据碱基配对原则，与待测标本中相应的单链DNA或RNA配对，形成核酸杂交体，然后通过标记物来检测待定的核酸。 人工被动免疫 常用制剂有： ①抗病毒免疫血清，现有抗麻疹、 抗狂犬病、抗乙型脑炎免疫血清等，这些免疫血清具有显著的预防作用； ②人免疫球蛋白制剂，包括人血清丙种球蛋白、胎盘球蛋白 ③特异性免疫球蛋白 病毒感染的治疗 1．抗病毒的化学制剂 目前抗病毒化学药物主要有核苷类药物。 （1）核苷类药物：通过阻抑子代病毒基因的合成与表达，抑制病毒复制 . 常用药物有: 用于DNA病毒感染:阿糖腺苷、碘尿苷、无环鸟苷、丙氧鸟苷，； 用于HIV感染:叠氮胸苷（AZT） 广谱抗病毒:3-氮唑核苷，对多种RNA或DNA病毒有抑制作用。 （2）病毒蛋白酶抑制剂：通过抑制病毒蛋白酶的活性，阻止病毒的复制. 常用药物有印地那韦、利多那韦等，对HIV有一定抑制作用。 （3）其它抗病毒药物：金刚烷胺或甲基金刚烷胺用于甲型流感的治疗，甲酸磷霉素用于疱疹病毒感染的治疗。 2．干扰素及干扰素诱生剂 : 干扰素具有广谱抗病毒作用，主要用IFN-α，副作用小，对某些病毒性疾病的防治有较好的效果 3．中草药 : 黄芪、大青叶、板兰根、贯众. 4．其他 :单克隆抗体、治疗性疫苗、细胞因子等免疫制剂 * 病毒感染的检查方法与防治原则 第一节 病毒感染的检查方法 1、 标本采集与送检： 用于分离培养的标本： 血清学诊断的标本： 采取急性期、 防止病毒灭活 双份血清 3、常规分离培养与鉴定 动物接种 鸡胚接种 组织培养 器官培养 移植培养 细胞培养 原代细胞培养 二倍体细胞培养 传代细胞培养 三大培养方法 病毒在细胞内增殖的指标 正常细胞 病变细胞 4.检查病毒抗原及抗体: 常用的抗原抗体检测法有酶联免疫吸附试验（ELISA） 免疫荧光 / 固相放射免疫测定 / 检测特异性抗体的快速诊断：IgM ELISA for HIV antibody Microplate ELISA for HIV antibody: coloured wells indicate reactivity (2)聚合酶链反应（PCR）： 它是一种快速体外扩增特异性DNA片段的新技术。(使待测的DNA扩增109倍，使标本中极其微量的核酸被检出。) 该法是先将待检标本中核酸提取，加热变性为单链作为模板,然后加入与模板基因有互补关系的引物、合成寡核苷酸所需的原料及DNA多聚酶等，在一定温度条件下使其按模板序列合成新的互补链。经过25～30个循环后，就可使DNA片段扩增109倍，大大提高了检测率此法敏感性极高，但需注意因操作时污染而出现的假阳性。 3.基因芯片技术（microarray chip） 病毒的快速诊断 光镜-----包涵体 电镜 免疫荧光 ELISA 分子生物学技术 杂交 PCR 第二节 病毒感染的防治 免疫预防 人工主动免疫 灭活疫苗： 乙脑疫苗 狂犬疫苗 流感灭活疫苗 HAV，HBV疫苗等 减毒活疫苗： 脊髓灰质炎疫苗 麻疹疫苗 腮腺炎疫苗 风疹疫苗 HAV疫苗 亚单位疫苗： 基因工程疫苗 合成肽疫苗 *