心肌细胞损伤模型的研究进展.docVIP

院学报, 2009; 32(6 ∶49～51 21　冀俊虎, 董联玲. 炮制夏天无对实验性偏头痛模型大鼠行为学的影 响. 山西医药杂志, 2008; 37(2 ∶135～136 22　李建绪, 李秀红. 小鼠口服延胡索与夏天无的镇痛作用比较. 中药 材, 2009; 3(32 ∶418～419 23　刘洪, 李容享. 气虚血瘀证与血管内皮细胞相关因子的研究进展. 中 国中医基础医学杂志, 2005; 11(7 ∶553～556 24　李磊, 刘建勋. 冠心病血瘀证病症结合客观化研究概况. 中国中医基 础医学杂志, 2008; 14(15 ∶396～400 心肌细胞损伤模型的研究进展 3 何　玲1 , 孙桂波2 , , 233 (1 哈尔滨商业大学生命科学与环境科学研究中心, 哈尔滨　150076; 2, 温州　325035 　　摘　要　 。由于各种心肌细胞模型的形成机制不同, 。本文结合自身的研究工作, 对国内外心肌细胞损伤, 。　　关键词　; 损伤模型　　随着生活水平的提高和人口老龄化, 同时受社会、环境等因素影响, 心血管疾病发病率逐年增加, 已成为人类死亡率最高的疾病之一。在心肌梗死, 缺血再灌注损伤等多种心血管疾病的发生发展过程中多伴有心肌细胞损伤, 进而发生细胞凋亡、钙超载等, 引起心血管功能的紊乱。由于受血流动力学、激素、神经反射的影响, 在体的心肌损伤模型很难准确地反映某些因子或因素在心肌细胞损伤中的作用。采用心肌细胞损伤模型能排除神经、体液等因素的影响, 所有的细胞处于均一环境中, 可以有效地观察药物对心肌细胞的直接作用, 并可对药物的作用机制进行深入探讨[1]。心肌细胞损伤模型在相关药物作用机理、心脏毒理研究及新药发现、新药评价中已成为不可或缺的手段。目前主要采用的心肌细胞损伤模型有缺氧再给氧、H 2O 2、阿霉素等诱导的损伤模型。由于各种心肌细胞损伤模型的形成机制不同, 确定不同药物对心肌细胞损伤模型的适用性对于药物的研究具有重要的意义, 本文结合自身的研究工作, 对国内外的心肌细胞损伤模型做一综述, 为心血管药物研究中心肌细胞损伤模型的客观选择提供参考。 1　缺氧再给氧损伤模型 　　心肌梗死是心肌缺血性疾病中最严重的一种, 心肌缺氧/ 再给氧是模拟心肌缺血再灌注损伤的心肌细胞损伤模型, 该模型可直接观察药物和不同条件处理对缺血再灌注损伤心肌细胞生理功能、生化代谢和形态结构等变化的影响, 同时可探讨心肌缺血再灌注损伤及药物作用的机制, 包括心肌细胞凋亡、钙超载等。是目前应用最多的心肌细胞损伤模型。目前造成缺氧模型主要有物理缺氧法和化学缺氧法。1. 1　物理缺氧法　　厌氧培养箱缺氧法　厌氧培养箱是一种在无氧环境下进 行细胞培养及操作的专用装置, 能提供严格的厌氧状态、恒定的温度培养条件并具有系统化、科学化的工作区域, 具有厌氧环境好、密风性能好、温控精度高、稳定性好、使用方便、工作安全可靠等优点。Park S 等人利用H 9C 2心肌细胞缺氧模型, 发现洋葱甲醇提取物0. 05g/ml 可以抑制ROS 升高、线粒体膜电位升高、细胞色素C 释放和cas pase 23活化, 证明洋葱甲醇提取物通过抗氧化途径保护损伤H 9C 2心肌细胞[2]。在龙牙　木总皂苷(A s 具有抗大鼠心肌缺血作用的前提下[3], 孙桂波等人采用厌氧培养箱造成心肌缺氧模型, 以此模型验证了A s 对缺氧再给氧损伤的心肌细胞亦具有保护作用[4]。 　　自制厌氧罐缺氧法　自制厌氧罐法具有经济、方便等优点, 但需进行可控性、稳定性研究方可进行实验。Ki m HS 等利用该法, 研究乳鼠心肌细胞在缺氧的条件下, 通过影响凋亡蛋白及抗凋亡蛋白的表达、膜电位及钙离子变化等证明硫喷妥钠具有心肌保护作用[5]。叶锦霞等用自制厌氧罐使大鼠乳鼠心肌细胞缺氧3h 再给氧1h, 造成心肌细胞损伤模型, 检测其生长、搏动功能、能量代谢、生物膜结构功能等都受到不同程度的损伤和破坏, 心肌酶LDH 释放及心肌细胞内MDA 、S OD 和GSH 2Px 的水平发生明显的变化, 可较好地复制心肌缺血再灌注损伤及心肌细胞氧化应激状态[6, 7]。 1. 2　化学缺氧法 　　CoCl 2致心肌细胞缺氧法　CoCl 2能引起类似缺氧/缺血的状况[8～10]。CoCl 2可增加心肌细胞内氧自由基的生成, 使心肌细胞内抗氧化能力减弱, 产生氧化应激反应, 进而损伤线粒体的功能。该模型与临床的心肌缺血差异较大, 因此应用较少。但 CoCl 2诱导心肌细胞凋亡可作为一种简易、方便、实用的心肌细 胞缺氧模型, 在深入探讨低氧诱导的心肌细胞凋亡的调控机制及心肌细胞保护机制方面应用较多。W ang Y 等采用200? M 1 8中药药理与临床2010; 26(6 3 基金项目:国家科技支撑