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一、组织学与胚胎学的研究内容 二、组织学与胚胎学的发展简史 三、组织学与胚胎学的研究技术 四、组织学与胚胎学的常用术语 五、组织学与胚胎学的学习方法 了解内容 自学 1、组织切片技术 石蜡切片 制作技术: 取材和固定 脱水和透明 浸蜡和包埋 切片和贴片 染色与封固 HE staining Hematoxylin苏木精:basic dye, purple-blue Eosin伊红: acid dye, pink Frozen section (冰冻切片) Better for preserving chemical components(e.g. enzymes) Freezing→cryotome →staining 2、组织化学技术 (1)、一般组织化学技术: PAS反应: 糖, 紫红色 油红O: 脂滴, 红色 甲基绿-焦宁:DNA, 蓝紫色 RNA, 红色 (链霉亲和素-生物素化酶复合法,简称SABC法) (strept avidin-biotin complex,SABC) 链霉亲和素,即链霉素抗生物素蛋白strept avidin,SA 3、活体组织研究技术 组织培养(体外实验 in vitro) 活体染色 细胞电泳 细胞融合 细胞分离 低温生物学 4、放射自显影术 亦称“同位素示踪术” 是应用某种具有放射性的同位素标记物,注入动物体内或加入细胞的培养基中,该物质被细胞摄取后,将组织或细胞制成切片或涂片,并在暗室中将切片或涂片表面涂一层感光乳胶,这时细胞中的放射性同位素产生的射线就会慢慢地使乳胶感光,经显影、定影处理后,在显微镜下观察标记物的分布和数量情况,就会细胞对某种物质的吸收、合成、分泌和代谢过程。 eg.用3H标记的亮氨酸,注入动物体内,3-5min在RER出现,20min在G,1-4h后聚集于酶原颗粒。 5、细胞形态结构测量术 细胞形态计量术:应用“图像分析仪”计算细胞内各微细结构的体积、周长、表面积、数量及分布等数值。 流式细胞术:应用“流式细胞仪”对单个细胞生物化学和物理特征进行快速定量测定。 显微分光光度测量术:应用“显微分光光度计”对标本中微细结构的化学成分及其含量进行测定。 6、显微镜技术 据光源不同分为:光学显微镜和电子显微镜 (1)、光学显微镜 一般光学显微镜(生物显微镜) 特殊光学显微镜 荧光显微镜 相差显微镜 暗视野显微镜 偏光显微镜 倒置显微镜 共聚焦激光扫描显微镜 (2)、电子显微镜 透射电子显微镜(TEM): 观察细胞内部结构 扫描电子显微镜(SEM): 观察组织或细胞表面的立体结构 超高压电子显微镜: Transmission Electron Microscope,TEM Scanning Electron Microscope ,SEM Scanning Electron Microscope,SEM 1、HE染色:是用碱性染料苏木精和酸性伊红染色方法。 2、嗜碱性:组织或细胞内的酸性物质被碱性染料苏木精染成蓝色,组织或细胞内的这种物质所具有染色特性。 3、嗜酸性:组织或细胞内的碱性物质被酸性染料伊红染成红色,组织或细胞内的这种物质所具有染色特性。 4、嗜中性:组织或细胞内的某些物质都不被碱性染料苏木精和酸性染料伊红染色,该物质所具有染色特性。 5、异嗜性:组织或细胞内的物质染色时,会出现与染料完全不同的颜色,该物质所具有染色特性。 6、PAS反应:过碘酸-雪夫氏反应。 7、Wright和Giemsa染色:瑞特和姬姆萨染色,用正甲蓝、伊红、天青染料,对血涂片进行染色的方法。 8、银染法:又称镀银法,染液内含硝酸银溶液,浸染切片后,银离子被还原成黑色颗粒沉淀;某些结构直接使银离子还原为银颗粒,称为亲银性,有些还需加还原剂才能显色称为嗜银性,主要显示神经组织。 1、理论与实际 2、结构与功能 3、平面与立体 4、静态与动态 5、个性与共性 小结 四、组织学与胚胎学的常用术语 五、组织学与胚胎学的学习方法 * * 绪 论 一、组织学与胚胎学的研究内容 组织学(histology):研究机体微细结构 及其相关功能的科学 。 胚胎学(embryology):研究个体发生、 生长、发育机 制的科学。 2、胚胎学研究内容: 1、组织学研究内容: 细胞 上皮组织 结缔组织 肌肉组织 神经组织 组织 个体 胚 (2~8周) 胎 (9~38周) 精子 卵子 受精卵 胚前
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