类风湿关节炎动物模型研究概况.docx

类风湿关节炎动物模型研究概况 类风湿关节炎动物模型研究概况 【摘要】类风湿关节炎是以关节滑膜慢性炎症为主的自身免 疫性疾病，病因及发病机制尚未完全清楚，具有易复发、难治愈、致 残率高等特点。动物模型在RA机制研究、药物筛选等方血具有重耍 的作用，文章对现阶段较常用的类风湿关节炎的造模方法、发病过程、 机制及其优缺点进行阐述，以期为今后的实验、临床研究提供依据。 【关键词】关节炎，类风湿；动物模型；自身免疫性疾病；综 述 类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)是一种以关节滑膜 慢性炎症病变为主要特征的自身免疫性病变。我国的患病率为 0. 32 %?0?36 %,是造成我国人群丧失劳动力和致残的主要病因之一 ［1］。国内外学者对RA进行了大量的动物实验研究，并形成了一些较 为成熟的动物模型，本文对现阶段较常用的关节炎模型进行简耍阐述, 以期借鉴。 1佐剂性关节炎(adjuvant arthritis, AA)模型 AA模型最先由细菌学家Freund于20世纪50年代创立，是建立 免疫性关节炎动物模型的常用方法［2］。多数是在大鼠足趾皮内注射 弗氏完全佐剂(CFA) 0. 1 ml致炎；但另有研究表明，0. 15 ml注射 量可能是RA模型复制中的最佳注射量［3, 4］o其发病机制主要为分 子模拟理论，CFA皮内注射延缓机体吸收，造成对机体不断刺激而产 生继发性自身免疫应答反应。 AA大鼠模型的原发病变属急性应激反应，致敏后即可出现致炎 侧的关节、足跖红肿。18?24天达峰值，持续3天后逐渐减轻；致 炎后10天左右发生继发病变，属自身免疫应答反应，20天左右达高 峰，一般表现为造模后出现的致炎侧、非致炎侧(对侧)及双前肢 的关节和足跖肿胀，耳、尾“关节炎”结节等［5］。 该模型是目前应用最广泛的模型复制方法，具有耗费少、方法简 单易行、病理表现类似于RA等优点；但AA缺乏慢性病理过程，病变 具有一定口限性。 2 胶原性(collagen-induced arthritis, CIA)关节炎模型 CIA模型是Trentham等1977年首次建立的实验性关节炎模型[6], 在大鼠背部、尾根部多点皮下注射CII胶原乳剂(1 mg-ml-1),每 只大鼠1.0 mlo初次免疫10天后加强免疫，再在鼠背部、尾根部皮 下注射1 ml乳剂(尽量避免与初次免疫注射位置相同)[7]。CIA 的发纶、发展是个复杂的免疫过程，由细胞免疫、体液免疫以及相关 的细胞因子共同参与，且受控于主要组织相溶性复合体。CIA模型具 有典型的关节炎体征，小鼠在致炎后24天左右出现，36天左右最严 重；大鼠14天左右出现，21天左右最严重。后足踝关节最常受累， 肿胀一般持续5?8周，最终导致关节的畸形。CIA的关节炎发病率 比单独使用弗氏完全佐剂注射显著提高，且CIA模型临床症状、病理 学改变等类似RA [8]o但CIA在同种属、同周龄、相同诱发因素和 生活环境下，发病吋间和差较大，临床表现轻重不一。 3卵蛋口诱导的关节炎模型 最早由Dumonde和Glynn于1962年首次建立[9]。用卵蛋口溶解 于生理盐水配成浓度为20 mg ? ml-1的溶液，与等量弗氏佐剂混匀， 注入动物背部皮下，每周1次，连续3周致敏，末次注射后1周于关 节内注入5 mg卵蛋口 [10] o其机制为关节内抗原持续存在，刺激滑 膜细胞出现抗体并形成抗原-抗体-C3复合物，激活补体产生局部炎 性反应，诱导T细胞介导的免疫反应，使大量淋巴细胞、单核-巨噬 细胞及中性粒细胞浸润于滑膜间质，逐渐形成血管翳，其覆盖软骨后 导致其变性和降解[11, 12]。 关节内注入抗原后，24 h出现关节红肿热痛等急性炎症的表现， 随后关节肿胀有所减轻，至14?21天达到平台期；1?4周内，关节 滑膜明显增生，血管翳形成，部分动物可出现早期软骨破坏；4周后 出现不可逆的关节软骨及骨破坏，最后可出现骨变形，最长到6个月 时能够观察慢性炎症仍存在。 该模型成功率高，可在兔、羊等动物上复制，关节和对较大，适 合需观察较大病变关节的研究，但免疫学指标及病程特点与RA具有 一定的差异性［13-16］ o 4病症结合模型 中医根据其临床特征，病症结合模型主要分为风寒湿痹阻症模型、 风湿热痹证模型和肾虚痹证模型。 风寒湿痹阻症动物模根据“风、寒、湿三气杂至，合而为痹”的 中医学理论，在造模的第1天，于大鼠右后足跖皮内注射CFA 0.1ml, 同吋将大鼠置于5?7 °C冰水中，水深2 cm,站立20 min,同吋伴 以4级风力吹，每天1次，连续14天［17］ o其他如将Wistar雄性大 鼠尾根部、颈背部皮内多点注射小牛11型胶原，其间每天在造模箱中 给了风寒湿三种外界因素刺激的，为改良的胶原诱导性关节炎动