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中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
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犛犖犜1171.1 2003
山羊关节炎脑炎抗体检测方法
酶联免疫吸附试验
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20030317发布 20030901实施
中 华 人 民 共 和 国 发 布
国家质量监督检验检疫总局
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犛犖犜1171.1 2003
山羊关节炎脑炎抗体检测方法
酶联免疫吸附试验
1 范围
本标准规定了应用酶联免疫吸附试验( )批量检测山羊血清中抗山羊关节炎 脑炎病毒抗体
ELISA
的方法。
本标准适用于山羊关节炎 脑炎的流行病学调查、诊断、检疫和疫情监测。
2 试验原理
酶联免疫吸附试验( )的基本原理是将酶分子与抗体或抗体共价结合,此种结合不改变抗体
ELISA
的免疫反应活性和酶的生化活性,酶标记抗体可与吸附于固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合,随
后加入的底物可在酶分子的作用下呈现颜色反应,因而可借颜色反应来判定有无相应的免疫反应,颜色
反应的深浅与样品中相应抗体或抗原的量呈正比,通过酶标仪可检测颜色反应的光密度值。本标准的
反应原理就是将 病毒抗原包被在 孔聚乙烯微量板上,接着加入按一定比例稀释的待检血清,待
CAE 96
反应一定时间后,加入酶标记的抗山羊免疫球蛋白抗体,反应完成后,加入底物显色并检测反应结果。
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3 试验准备
3.1 仪器
二氧化碳培养箱、酶标仪、倒置显微镜、超速离心机、高速离心机、细胞培养瓶、多孔道微量加样器、
96孔聚乙烯微量板等。
3.2 试剂
3.2.1 犜犖犈缓冲液
/ , , / 氯化钠, / 。
0.01molLTrisHCl H7.40.01molL 0.001molLEDTA
p
3.2.2 洗涤液
含 0.
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