SN／T 2669-2010_三系杂交水稻种子真伪分子鉴定方法.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 / — SNT2669 2010 三系杂交水稻种子真伪分子鉴定方法 Molecularidentificationofthree-linehbridriceseeds y ㅤㅤㅤㅤ行业标准 2010-11-01发布 2011-05-01实施 中 华 人 民 共 和 国 发 布 国家质量监督检验检疫总局 / — SNT2669 2010 三系杂交水稻种子真伪分子鉴定方法 1 范围 本标准规定了三系杂交水稻种子真伪分子鉴定方法。 本标准适用于通过胞质不育获得的杂交水稻种子的真伪鉴定。 2 规范性引用文件 。 , 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 凡是注日期的引用文件 仅注日期的版本适用于本文 。 , ( ) 。 件 凡是不注日期的引用文件 其最新版本 包括所有的修改单 适用于本文件 / 农作物种子检验规程 扦样 GBT3543.2 / 分析实验室用水规格和试验方法 GBT6682 / 基因检验实验室技术要求 SN T1193 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 ㅤㅤㅤㅤ行业标准 3.1 三系杂交水稻 three-linehbridrice y 、 , , 包括不育系 保持系和恢复系 用不育系作母本与其同型保持系杂交繁育不育系种子 用不育系作 母本与恢复系杂交生产杂交稻种子。 4 原理 , 根据水稻基因组中与雄性不育相关的线粒体 R2-630WA基因片段的核苷酸序列 设计特异性引物 , , 和荧光探针 应用实时荧光 PCR技术对杂交水稻种子进行快速鉴定 通过检测杂交水稻种子中是否含 有胞质不育基因片段来判断真伪。 5 实验方法 5.1 主要仪器 5.1.1 实时荧光 PCR仪。 5.1.2 核酸蛋白分析仪。 , , 。 5.1.3 高速冷冻离心机 台式小型离心机 Mini个人离心机 , 。 5.1.4 低温冰箱 冷藏冷冻冰箱 5.1.5 旋涡振荡器。 微量移液器( 、 、 、 、 、 )。 5.1.6 2.5 L10 L20 L10