逍遥散的抗抑郁研究-毕业论文(设计).docVIP

逍遥散的抗抑郁研究 摘要：探讨逍遥散的抗抑郁作用，为其疏肝解郁功效及临床应用提供药理学参考。方法：采用小鼠的小鼠慢性温和不可预知应激(CUMS)结合孤养抑郁模型的建立、小鼠体重测定 、糖水消耗量实验 、小鼠自主活动测定、Morris水迷宫等实验观察逍遥散的抗抑郁作用。 关键词 抗抑郁 抑郁症是一种常见的精神疾病，近年来其发病率呈不断上升趋势，已成为全球性的主要精神卫生问题之一，与其相关的治疗药物日益受到重视。逍遥散功用疏肝解郁、健脾养血，主治肝郁血虚脾弱之证，是调和肝脾的代表方药。大量临床资料显示该方在精神科疾患治疗中运用广泛，特别是在抑郁症的辅助治疗中取得较好疗效。 已有报道显示逍遥散可减少行为绝望模型小鼠的不动时间，提高CUMS模型大鼠的糖水消耗量等，表现出抗抑郁效应。为进一步验证其抗抑郁作用，本课题通过利用一系列轻、中等强度的不可预知刺激结合孤养方式对小鼠连续实施6周，造成CUMS结合孤养的小鼠抑郁模型，以小鼠体重变化、行为学指标和糖水消耗实验来判定逍遥散的抗抑郁作用。糖水消耗量反映动物的奖赏反应程度，模型动物出现糖水饮用量下降的现象，称之为快感缺失，是抑郁症的核心症状。本次实验结果表明：小鼠被施加慢性轻度不可预知应激结合孤养造模程序6周后，与空白组小鼠比较，其体重增长缓慢，小鼠的糖水饮用量明显降低，阳性药阿米替林给予后可逆转上述变化。此外，实验中采用Morris水迷宫对模型小鼠的空间学习记忆能力进行检测，发现模型小鼠该能力明显下降。Morris水迷宫检测的是动物的定向和搜索行为，能反应动物对陌生环境的学习和记忆能力。因此，可以认为CUMS结合孤养的造模方式不仅可干预小鼠的生长，降低小鼠的活动性、社会交往能力，使模型小鼠出现抑郁症的核心症状-----快感缺失，而且还能模拟临床抑郁症患者思维迟钝、学习记忆能力下降的表现，表明本次实验小鼠抑郁模型复制成功。模型动物在给予逍遥散治疗后，逍遥散30、20g·kg-1剂量组可不同程度逆转上述变化，表明逍遥散具有抗抑郁作用。同时，研究采用小鼠自主活动实验，检测逍遥散在所试剂量下有无中枢兴奋作用。实验结果表明，逍遥散在所试剂量下对小鼠的自主活动无影响，表明其无中枢兴奋作用，进一步明确了该方在所试剂量下的抗抑郁作用。 综上，逍遥散不仅具有较好的抗抑郁作用，还可提高正常及抑郁模型小鼠空间学习记忆能力，其作用可能与影响单胺类递质及抗氧化、改善脑内血液循环有关。 1实验材料 1.1实验药品 逍遥散水煎液：组成按照《方剂学》所载：柴胡9g，当归9g 白芍9g，白术9g，茯苓9g，甘草4.5g，薄荷少许，生姜一块。药材均购自成都中医药大学附属医院老中医门诊部，经成都中医药大学中药标本中心卢先明教授鉴定，柴胡为伞形科植物柴胡Bupleurum chinense DC.的干燥根，当归为伞形科植物当归Angelica sinensis (Oliv.) Diels.的干燥根，白芍为毛茛科植物芍药Paeonia lactiflora Pall.的干燥根，茯苓为多孔菌科真菌茯苓Poria cocos(Schw.)Wolf.的干燥菌核，白术为菊科植物白术Atractylodes macrocephala Koidz.的干燥根茎，甘草为豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch的干燥根及根茎，薄荷为唇形科植物薄荷Menthae haplocalyx Briq.的干燥地上部分。制备方法：按比例取以上药材加8倍量水浸泡30min，加热煮沸，文火煎煮1h，趁热滤过；同法煎煮40min及30min；合并三次滤液，文火浓缩至含生药1g·ml-1和1.5g·ml-1，药液4℃冰箱保存备用。 煎剂采用高效液相色谱法(《中华人民共和国药典》2005年版)对其中的芍药苷进行定量分析，制备满足样品含量范围的标准曲线(见图1)，计算样品中芍药苷的含量。结果表明：逍遥散1.5g·ml-1、1g·ml-1及0.5g·ml-1水煎液中分别含芍药苷1.13mg·ml-1、0.75mg·ml-1和0.38mg·ml-1，色谱图见图2,3。 Fig1.Standard cuve of peoniflorin 9.991 9.991 Fig2.HPLC chromatography of peoniflorin 9.402 9.402 Fig3. HPLC chromatography of Xiaoyao powder decoction 阿米替林：SIGMA公司，批号039K1600，临用时用生理盐水配成所需浓度溶液。 1.2实验试剂 芍药苷对照品：中国药品生物制品检定所，批号：110736-201026。 0.9％氯化钠注射液