《db34 t 822-2008 动物组织中地西泮的残留测定-酶联免疫吸附法》.pdf

ICS 备案号： DB34 安 徽 省 地 方 标 准 DB34/T 822—2008 动物组织中地西泮的残留测定 ——酶联免疫吸附法 2008-08-01 发布 2008-08-01 实施 安徽省质量技术监督局 发布 DB34/T 822—2008 前 言 本标准由安徽省畜牧兽医局提出。 本标准由安徽省质量技术监督局批准。 本标准由安徽省农业标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：安徽省兽药饲料监察所、安徽省畜产品质量安全检测中心。 本标准起草人：许世富、陶小平、刘红云、汤春莲。 本标准于2008年8月1日首次发布。 I DB34/T 822—2008 动物组织中地西泮的残留测定 ——酶联免疫吸附法 1 范围 本标准规定了动物肌肉、肝脏、肾脏中地西泮检验的制样和酶联免疫吸附测定方法。 本标准适用于动物肌肉、肝脏、肾脏中地西泮的残留快速测定。 本方法在动物肌肉、肝脏、肾脏中的检测限为1.5μg/kg，线性范围：0.0075ng～0.25ng。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的 修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 试样制备 动物肌肉、肝脏、肾脏，去筋后切成小块，制成肉糜后，于－18℃以下温度冷冻保存。 4 原理 残留在组织中的地西泮经样品提取液提取后，用于酶联免疫分析。测定方法是酶联免疫法中的竞争 性测定法，其主要原理是：吸附在孔内的地西泮与标准或样品中的地西泮竞争性地与地西泮抗体相结合， 与标准品或样品相结合的地西泮抗体被洗涤去除后，只剩下与微孔内药物相结合的抗体，加入一定量的 显色底物，酶的颜色变成蓝色，加入终止液后颜色由蓝色变成黄色。在450nm处进行吸光度测量，换算 后可以获得样本中地西泮的浓度含量，在一定浓度范围内吸光度的高低与样品中地西泮的含量成反比。 5 试剂和溶液 5.1 除非另有说明，本法所用试剂均为分析纯，水为去离子水，符合 GB/T 6682 二级水的规定。 5.2 竞争酶标免疫法地西泮检测试剂盒 2℃～8℃冰箱中保存。 5.2.1 微孔板：包被有地西泮抗体。 5.2.2 地西泮标准溶液，0.1μg/mL。 5.2.3 酶标物冻干粉。 5.2.4 酶标物溶解液。 5.2.5 浓缩稀释液。 5.2.6 浓缩洗涤液。 5.2.7 显色剂。 5.2.8 终止液。 5.3 地西泮标准工作液：取地西泮标准溶液，用稀释液稀释为浓度范围 0.15μg/L～5.0μg/L。 5.4 洗涤液：用水 10 倍稀释厂商提供的浓缩洗涤液。 5.5 稀释液：用水 10 倍稀释厂商提供的浓缩稀释液。 5.6 酶标物溶液：在