生物试样分析的前处理.docVIP

生物试样分析的前处理 户田昭三 钟辉 译 友岩 校 一、前言 以电感耦合等离子发射光谱法〈ICP〉或原子吸收法〈AAS〉对生物试样中金属元素进行一般性测定时，必须预先处理水分及有机物等试样主体成分。生物体中含有70％以上的水分，各种生物体中水分含量列于表1。 表1 生物试样中的水分和灰分 品名 水 分（%） 灰 分（%） 谷物 13.5~15.5 1.3~2.4 豆类 12.5~15.5 2.2~5.0 根类 68.2~83.0 1.0~0.4 鱼贝类 61.1~76.0 1.1~1.8 肉类 46.1~76.8 0.2~1.5 肥肉 15.7~27.8 0.2 蔬菜类 88.9~96.4 0.4~1.4 果实 83.1~91.0 0.3~0.5 藻类 68.1~90.5 3.3~24.9 生物体内元素的浓度一般是按照干燥体或新鲜生体计算的，也有按照灰分重量计算元素含量的。在某些特定的情况下，也有根据某种特定成分的含量计算其它成分含量的。以新鲜生物体为准计算测定成分的含量时，由于取样后试样的经历和保存方式的不同，水分含量也不同，测定值的重现性很差。 二 取样 保存 生物试样中微量元素的含量与工业制品的情况不同，即使从同一场所采取试样，每个生物体之间也有很大差别。还必须考虑到由于采样环境、粘附或混入试样中物质的影响，如粘在根上的土及叶子上的灰尘等应该洗净。由于海水、河水中金属元素含量非常低，不必顾虑试样粘上的水会使金属元素的含量发生很大变化，可用滤纸或纱布将水轻轻擦拭干净。 生物死亡之后，由于自身新陈代谢的加剧，组织腐败，NA ﹑K﹑ CA﹑ CI等离子随渗出的细胞液流失，会使得测定值发生很大变化。因此，最好是在采取试样后尽可能快地处理。植物的种子和薯类那样的生物组织如果处于暂时的生长状态，即使经过数日，除水分之外其它成分也不会发生很大变化，动物的肌肉等可用冰在4°C以下保存数小时，长时间放置最好冷冻保存。 红血球等细胞膜脆弱的试样，冷冻会破坏细胞膜，使细胞液流出与细胞外液〈如血清〉混合而得不到真正的分析数值。红血球[1]内Zn、K、Ca﹑Fe、Na的含量分别为10, 3600, 0.67, 1000, 200ug/ml, 而血清中上述元素的含量分别为0.6~1.2, 160, 100, 1.0, 3300ub/ml,应该注意到这种悬殊的差别。测定血液中的成分时，取样后必须尽快进行分离处理，然后再保存，或者采样于定量容器内，分析时处理全部试样后测定，以全血中的含量表示。 保存干燥试样时应置于干燥、避光的场所，可用硅胶等降低试样保存环境的温度。用干燥氮气置换保存容器内的空气，或封入防老化箱、一次性手炉那样的装有脱氧剂的包装之内，可长期保存。只是这类包装含有铁、钙等物质，启封时必须注意。 三 干燥 从生物试样的保存和运输方面考虑，干燥的试样较为方便，为了准确、精密地分析和表达试样中金属元素含量，最好使用干燥试样并按照干燥试样的单位重量计算成分含量。某些种类的试样，在一定的条件下干燥会造成低分子有机化合物的分解和挥发，Se、Hg、As等元素也会损失。 生物试样的干燥条件应根据试样的种类而异，例如碳水化合物含量高的试样水分与碳 的结合力很强，需要较高的干燥温度。对于脂肪含量低水分含量高的试样，应预先在60～70°Ｃ 通风干燥，使之与大气中蒸汽压达到平衡之后再做作进一步处理。表2中列出了日本科学技术厅和资源调查委员会颁布的食品标准分析方法中为测定水分含量所规定的干燥条件。表内所列的条件对于分析食品中无机成分是毫无问题的，但分析其中某些易挥发成分时则需要更稳妥的干燥方法。分析美国商务部标准局（NBS）和日本环境厅国立公害研究所制备的用于分析金属元素成分的生物试样时，分析前的干燥条件如表3所示。同时也指出，分析Hg、Se、As时所用的试样不经干燥直接使用。另行取样在指定条件下干燥，测定试样的水分，将分析试样换算成干燥试样重量后计算测定成分含量。 蔬菜、水果、藻类等水分含量高达90％左右的试样，若