12 微生物的实验室培养.pptxVIP

第一节第一课时病毒细菌放线菌真菌原生动物病毒界微生物包括哪五类： 原核真菌界真核 原生生物界特点：结构都相当简单,多数个体十分微小(o.1mm)的生物的总称。 通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有的甚至没有细胞结构.且体内一般不含有叶绿素.不能进行光合作用. 病毒SARS病毒 禽流感病毒朊病毒（蛋白质病毒）真菌酵母菌和霉菌青霉如图是酵母菌电子显微镜下的形态结构 一、课题目标： 了解有关培养基的基础知识，进行无菌技术的操作，进行微生物的培养。二、课题重点和难点：无菌技术的操作。三、技能目标： 掌握培养基的制备、高压蒸气灭菌和平板划线法等基本操作技术，熟练、规范地进行无菌操作，成功地培养微生物。一 基础知识:（1）按培养基的化学成分分：·天然培养基·合成培养基·半合成培养基阅读课本分别说出它们的优点、缺点。（2）按培养基的物理形态分：液体培养基半固体培养基固体培养基（3）按培养基的功能分： 基础培养基选择培养基鉴别培养基液体培养基半固体培养基固体培养基据物理性质分天然培养基合成培养基据化学成分分选择培养基鉴别培养基据用途分培养基的种类在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长。例如，在培养基中加入青霉素，以抑制细菌、放线菌的生长，从而分离到酵母菌和霉菌。又如，在培养基中加入高浓度的食盐可以抑制多种细菌的生长，但不影响金黄色葡萄球菌的生长。根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成，用以鉴别不同种类的微生物。例如，在培养基中加入伊红和美蓝，可以用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌等细菌：如果有大肠杆菌，其代谢产物就与伊红和美蓝结合，使菌落呈深紫色，并带有金属光泽。常用于工业生产常用于观察微生物的运动、鉴定菌种用于微生物的分离、计数常用于工业生产常用于分类、鉴定选择培养基加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌不加氮源的无氮培养基: 分离固氮菌不加含碳有机物的无碳培养基: 分离自养型微生物加入青霉素等抗生素的培养基: 分离导入了目的基因的受体细胞加入氨基喋呤、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷的培养基: 分离杂交瘤细胞合成培养基: 根据细胞生存所需物质的种类和数量，用人工方法模拟合成的。 合成培养基主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。 优点：标准化生产，组分和含量相对固定;成本低 缺点： 缺少某些成分，不能完全满足体外细胞生长需要。天然培养基： 天然培养基有血清、血浆、和组织提取液（如鸡胚和牛胚浸液）。优点：营养成分丰富，培养效果好缺点：来源受限;成分复杂，影响对某些实验产物的提取和实验结果的分析;易发生支原体污染;固体培养基：菌落液体培养基：表面生长均匀混浊生长沉淀生长半固体培养基：无动力 有动力(弥散)(是否运动) 培养基的配制原则：①目的要明确：根据培养的微生物种类、培养的目的等确定培养基的类型和配制量。②营养要协调：培养基中各种营养物质的浓度和比例要适宜。例如：碳氮比4∶1时，谷氨酸棒状杆菌大量繁殖而产生谷氨酸少；碳氮比为3∶1时，菌体繁殖受抑制而谷氨酸合成量大增。③pH要适宜：细菌培养基pH中性或偏碱性，霉菌培养基呈酸性。细菌pH为：6.5-7.5；放线菌pH为：7.5-8.5；真菌pH为：5.0-6.0Cncnc-micro微生物的五种营养要素 凡能为微生物提供生长繁殖所需碳元素的营养物质都称为碳源 。碳源 凡是能为微生物提供所需氮元素的营养物质都称为氮源。氮源（nitrogen source） 无机盐（mineral salts） 生长因子微生物生长不可缺少的微量有机物质叫生长因子。维生素 氨基酸 碱 基 水（wahtor） Cncnc-micro碳源种类无机C源：CO2、碳酸盐，只能被自养微生物利用有机C源：各种糖类，其次是有机酸、醇类、 脂类和烃类化合物 Cncnc-micro氮源种类分子态氮：固氮微生物以分子氮为唯一氮源 无机态氮：硝酸盐、铵盐几乎所有微生物能利用 有机态氮：蛋白质及其降解产物 a实验室常用牛肉膏、蛋白胨、酵母膏做氮源 b生产用玉米浆、豆饼、葵花饼、花生饼等Cncnc-micro无机盐（mineral salts） 无机盐功能 构成微生物细胞的组成成分 调解微生物细胞的渗透压， PH值和氧化还原电 位 有些无机盐如S、Fe还可做为自养微生物的能源 构成酶活性基的组成成分，维持酶活性。Mg、Ca、K是多种酶的激活剂 Cncnc-micro无机盐种类 构成微生物细胞以C、H、O、N、P、S六种元素为主，约占细胞干重的95％以上； Ca、K 、Mg、Fe为大量元素，以无机盐阳离子形式被吸收，配培养基要加磷酸盐、硫