槛槛槛槛槛东亚飞蝗羧酸酯酶基因的克隆和原核表达.PDF

应用昆虫学报 Chinese Journal of App lied Entomology 20 12 ，49 (3 ):666—672 殤檻檻檻檻檻殤 檻 檻 檻 研究论文檻 殤檻檻檻檻檻殤 东亚飞蝗羧酸酯酶基因的克隆和原核表达* 李 清 张学尧 张建珍 马恩波＊＊ (山西大学应用生物学研究所 太原 030006 ) ， 摘 要 羧酸酯酶是昆虫体内重要的代谢解毒酶系 其主要功能是水解和结合内源性和外源性含有酯键的有毒 ， 。 Locusta migratoria manilensis (Meyen) ， 物质 减缓其到达靶标部位的时间 东亚飞蝗 是我国重要的农业害虫 对其 。 (CarE4 ) 羧酸酯酶基因克隆和表达有助于深入探索杀虫剂代谢毒理机制 本研究首先对羧酸酯酶基因 进行了克 ， pCold TF DNA Vector ， ， 隆 并将其插入到 中 在大肠杆菌中进行了原核表达 最后用疏水层析和离子交换层析方法 。 ， 对目的蛋白进行了纯化 本文成功建立了羧酸酯酶蛋白原核表达和纯化技术体系 为进一步研究东亚飞蝗羧酸 、 。 酯酶的生理功能 结构特点和作用原理提供了基础资料 ， ， ， ， 关键词 羧酸酯酶 东亚飞蝗 克隆 离子交换层析 疏水层析 Cloning and prokaryotical expression of CarE gene in Locusta migratoria manilensis LI Qing ZHANG Xue-Yao ZHANG Jian-Zhen MA En-Bo ＊＊ (Institute of Applied Biology ，Shanxi University ，Taiyuan 030006 ，China) Abstract The migratory locust ，Locusta migratoria manilensis (Meyen ) O(rthoptera :Acridoidea )，is one of the most important pests in China． Carboxylesterase is an important metabolic detoxification enzyme in insects the main function of which is the hydrolysis of endogenous and exogenous toxic substances containing ester bonds． In this study ，the carboxylesterase gene (CarE4 )was cloned and inserted into the pCold TF DNA vector ． A recombinant carboxylesterase was successfully expressed in E． coli and the recom