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第十一章 消毒与灭菌 消毒与灭菌 消毒(disinfection):杀死物体上病原微生物的方法,并不一定能杀死含芽胞的细菌或非病原微生物。用以消毒的药品称为消毒剂(disinfectant)。 灭菌(sterilization):杀灭物体上所有微生物的方法。灭菌比消毒要求高,包括杀灭细菌芽胞在内的全部病原微生物和非病原微生物。 抑菌(bacteriostasis):抑制体内或体外细菌的生长繁殖。常用的抑菌剂为各种抗生素。 防腐(antisepsis):防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法。细菌一般不死亡。 无菌(asepsis):不存在活菌。 无菌操作(antiseptic technique)指在进行外科手术或分离、转种及培养时防止其他微生物污染实验材料的操作方法。 Carbolic Steam Spray 第一节 物理消毒灭菌法 热力灭菌法 辐射杀菌法 滤过除菌法 超声波杀菌法 干燥与低温抑菌法 湿热灭菌比干热效果好 湿热灭菌时,菌体蛋白质较易凝固。湿热灭菌时,菌体吸收水分,蛋白质含水愈多,凝固所需温度降低。 湿热穿透力比干热大,可使被灭菌物品内部温度迅速上升。 湿热蒸气可放出潜热,这种潜热迅速提高被灭菌物体的温度 。 干热灭菌与湿热灭菌穿透力及灭菌效果比较 湿热灭菌法(一) 1. 巴氏消毒法:杀灭液体中的病原菌或特定微生物,不耐热成分不被破坏。61.1~62.8℃30min或71.1℃15~30s,一般用于酒类、牛乳等的消毒。 2. 煮沸法:100℃5min杀灭繁殖体,1-2h杀灭芽胞,加入2%的碳酸氢钠,促进芽胞的杀灭,防止金属器皿生锈,一般用于食具、刀剪、注射器的消毒。 6. 高压蒸汽灭菌法 压力103.4kPa(1.05kg/cm2),121.3℃,15~20min,杀灭包括细菌芽胞在内的所有微生物。一般培养基、生理盐水、手术敷料等物品。 利用水的沸点随水蒸汽压力的增加而上升的原理 四、超声波杀菌 机制:不被人耳朵感受的高于20千赫/秒的声波,称为超声波。由于超声波频率高,可裂解许多细菌,G-菌尤敏感,但裂解并不彻底。 用途:主要用于粉碎细胞,提取细胞组分以及制备Ag ,洗涤等。 五. 渗透压 主要用于防腐 滤菌器的种类 薄膜滤菌器:孔径0.22 ?m 玻璃滤菌器 石棉滤菌器 素陶瓷滤菌器 滤菌器 第二节 化学消毒灭菌法 消毒剂的种类:酚类、醇类、重金属盐类、氧化剂、表面活性剂、烷化剂。 消毒剂的应用:病人排泄物与分泌物、皮肤、粘膜、饮水、厕所、空气、手。(常用的化学消毒剂及防腐剂对人体组织都有危害,所以只限于外用或环境消毒。) 一、消毒剂的主要类型及应用 消毒剂的应用 消毒剂的应用(一) 病人排泄与分泌物 :一般用等量的20%漂白粉、5%石炭酸或2%来苏,搅拌均匀放2h。 皮肤:70%酒精、2.5%碘酒、2%红汞。 粘膜:3%H2O2用于口腔粘膜消毒、0.01%-0.1%洗必泰或高猛酸钾用于冲洗尿道、阴道、膀胱等;1%硝酸银给新生儿滴眼以预防淋球菌感染。 饮水:自来水用氯气、少量的饮水可用漂白粉。 消毒剂的应用(二) 手:一般用2%来苏;0.2%-0.4%过氧乙酸浸泡2%碘酊涂擦后用70%酒精擦洗。 厕所、阴沟:生石灰。 空气:甲醛(实验室)12.5~25ml/m3加热熏蒸12~24hr或甲醛40ml+高锰酸钾30g/m3混合熏蒸12~24hr,肝炎病房用过氧乙酸3g/m3熏蒸90min。 二、影响消毒剂作用的因素 选择适当的消毒剂 低毒 价廉 低破坏 方便 易贮藏 有效 * * 公元325年,古希腊出现世界上以在传染病流行时收容病人和为穷人提供医务服务的首家医院。由于医院的客观条件极差,医院感染情况非常严重。 产褥热是当时欧洲医院感染中造成损失最大、问题最严重、研究最多、并最终得到解决的问题。Thomas Lightfoot曾认为“产院是引导产妇走向死亡之门”。由于产褥热的危害和影响,直至1940年,在某些发达国家仍有50%的产妇不愿到医院分娩。1843年,Holmes发现产褥热与医生在尸检后不洗手就检查产妇与接生有关。 英国外科医生Lister(1827-1912)首先简明细菌与感染的关系,并提出消毒的概念,并于1867年发表了著名的有关外科无菌操作技术的论文,其中大部分原则仍沿用至今。 Halstead在John Hopkinks 医院工作时,因其未婚妻(手术室护士)对升汞洗手过敏,便请Goodyear公司于1889年制作了两付橡胶手套,从此开创了外科手术时戴手套的新纪元。 一. 热力灭菌法 湿热80℃经5-10min可杀死所有细菌繁殖体和真菌 多数无芽胞细菌经55-60℃作用30-60mi
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