细胞生物学研究的方法.pptVIP

第三章 细胞生物学研究方法 一、细胞形态结构观察 （一）光学显微镜： 1、普通光镜的性能指标：放大率（放大倍数）分辨力、清晰度、焦点深度、镜象亮度。 分辨力（分辨率、分辨本领）：能分辨两个物点之间最短距离的能力，通常是以分辨距离来表示的，即分辨距离越小则分辨力越高。 人肉眼分辨力测试是规定在明视距离25cm所分辨的最短间距来表示，正常人肉眼分辨力的极限值是0.1mm(毫米)，显微镜的分辨力可按下列公式来计算 R=0.61λ/N.A （R 是分辨距离，0.61是常数， λ是照明光波波长，N·A是显微镜物镜的镜口率——光学性能指标，每个物镜上都标有其镜口率的数值）。 ∵分辨距离R与镜口率N·A 成反比， ∴若把最大镜口率1.25（即油镜镜口率）代入公式，可以最小分辨距离≌/2由于可见光中最短波长（紫光）为0.4um（即400nm）。 ∴普通光镜最大分辨力的理论极限为0.2um ,请记住0.2um，这个数值就是显微镜水平与亚（超）微水平的分界线。 ∵显微镜的分辨力是有一定的极限， ∴其放大率受分辨力制约而不可能无限提高，普通光镜放大率的经验界值：有效放大倍数极限=物镜镜口率×1000。 例普通显微镜的油镜镜口率为1.25,故此台显微镜的最大有效放大倍数为