基因工程(三) 九、目的基因的高效表达 (一)、基因表达的基础知识 (二)、原核生物基因表达的基本特点 (三)、提高目的基因高效表达的途径 (四)、目的基因高效表达规律 (一)、基因表达的基础知识 1 概念: 1-1 以mRNA为模板的蛋白质合成过程称为翻译或转译 1-2 mRNA: 从DNA到蛋白质的信息传递载体 1-3 遗传密码: 3个碱基编码一个氨基酸,这三个碱基被称为三联体密码或密码子 2 核糖体:合成蛋白质的“工厂” 核糖体由两个亚基构成,一个较大,一个较小 原核生物 3.蛋白质的合成机理(以原核生物为例) 肽链延伸的方向:N末端—C末端 mRNA的翻译方向:5’——3’方向 tRNA识别密码子,并转运氨基酸 合成的起始:大肠杆菌中被翻译的第一个密码子往往是5’端的第25个核苷酸以后,起始密码子:AUG,偶有GUG,在上游约10个bp的地方往往有一段富含嘌呤的序列(SD序列),它与16SrRNA3’端互补。 合成的步骤:新进入的酰胺-tRNA结合到核糖体上——肽链的形成——移位 合成的终止:识别终止信号: UAG,UAA,UGA 4 多肽合成后的定向加工与转译后加工 4-1 信号肽:在真核生物中,当某一种多肽的N-末端刚开始合成不久,这种多肽的取向就被决定,这是因为受这个N末端的信号肽的控制。 在细菌中,也存在类似情况,新
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