第十二章 基因功能分析的基本策略 转基因模型是研究基因功能的主要手段 转基因生物: 外源基因导入生物体表达。 基因打靶: 外源基因替换内源基因。 基因敲除。 基因敲入。 基因沉默: 导入特定基因,抑制内源性基因表达。 第一节 转基因技术 转基因技术(transgenic technology):将外源基因导入细胞,随机整合到受体基因组内,并随细胞分裂而遗传给后代。 细胞模型。 转基因动物。 转基因植物。 一.转基因生物的意义 20 世纪 80 年代 (Brinster and Palmiter): 著名的转基因小鼠实验,金属硫蛋白基因启动子驱动大鼠生长激素基因表达。 转基因生物的用途: 研究手段:疾病的转基因动物模型。 改良动物性状:抗病性、耐寒性等。 生产产品:抗体、疫苗等的生产。 二、基本原理 构建携带目的基因的载体。 外源基因导入:将目的基因通过显微注射等方法注入实验动物的受精卵或着床前的胚胎细胞中。 使目的基因整合到基因组中。 将此受精卵或着床前的胚胎细胞再植入受体动物的输卵管或子宫中。 使其发育成携带外源基因的转基因动物。 基本原理 基本原理 基本原理 基本过程 上游—基因改造和载体构建 中游—基因转移、胚胎移植与建系 下游—基因整合、表达的检测与细胞筛选 1. 上游—基因改造和载体构建 外源基因: 完整的转录单位, 由顺式作用元件、结构基因和转录终止信号组成。 报
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