植物生长物质(七)).ppt

研究植物生长物质的方法(自学) (一)生物测定法 生物测定法是通过测定激素作用于植株或离体器官后所产生的生理生化效应的强度，从而推算植物激素含量的方法。 比如生长素的生物测定，可用小麦胚芽鞘切段伸长法。 早期激素的鉴定几乎全靠生物测定法，但灵敏度及专一性均不够高。 但可应用于从大量人工合成的化合物中筛选植物生长调节剂。 鉴定和应用于某种激素的基因型突变品系的研究。 (二)物理和化学方法 植物激素的测定分析采用薄层层析(TLC)、气相色谱(GC)、高效液相层析(HPLC)和质谱分析(MS)等，其原理大都是基于不同物质在不同介质中有不同的分配系数。用这些方法测定生长素可达到10-12g的水平。 色质联谱(GC-MS)可以更为精确地检测多种激素，比如赤霉素的测定，先用气相色谱分离提取出混合物中的几十个组分，然后将赤霉素组分再进入质谱仪进行定性定量分析，由于质谱专一性很强，不致造成对非赤霉素物质的错误判断。 (三)免疫分析法 近年来发展起来的免疫分析法被用来定性、定量测定各种植物激素。 当抗体和抗原相互接触就会产生沉淀反应，根据不同的已知浓度的抗原与抗原抗体沉淀量的关系式，便可计算样品中的激素含量。 放射免疫检测法(radioimmunoassay,RIA)和酶联免疫吸附检测法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)是当前常用的两种激素定量技术。其优点在于高专一性，高灵敏性，操作简便，样品往往只需初步纯化。 §7-1 生长素(auxin,indole-3-acetic acid, IAA) 一. IAA的发现 二、IAA在植物体内的分布和运输 三. IAA的存在形式与代谢 诺曼利(Normanly)等(1995)提出植物细胞中IAA水平的影响因素如下： 四. IAA的生理效应 五、IAA的作用机理雷(P.M.Ray)将燕麦胚芽鞘切段放入一定浓度生长素的溶液中，发现10～15min后切段开始迅速伸长，同时介质的pH下降，细胞壁的可塑性增加。 植物体内生长素的分布情况如何? 何谓极性运输? IAA生物合成的前体物质是什么? 什么是束缚型生长素?它有没有生理活性? 植物体内IAA分解的途径有哪两条？ 生长素有哪些生理效应? 不同器官对生长素的敏感性如何? 试述生长素作用的酸性生长假说? 何谓生长素受体? §7-2 赤霉素(gibberellin, GA) 一、GA的发现和种类 三、GA的生理效应 四、GA的作用机理 §7-3 细胞分裂素(cytokinin，CTK) 一、CTK的发现和种类 二、CTK的分布与代谢 关键步骤是异戊烯基焦磷酸(isopentenyl pyrophosphate,iPP)和AMP，在异戊烯基转移酶(isopentenyl transferase)催化下，形成异戊烯基腺苷-5′-磷酸，进而在水解酶作用下形成异戊烯基腺嘌呤。异戊烯基腺嘌呤如进一步氧化，就能形成玉米素。 三、CTK的生理效应 四、CTK的作用机理 §7-4 脱落酸(abscisic acid，ABA) 一、ABA的发现 二. ABA的分布与代谢 图 高等植物中生物合成脱落酸的可能途径直接途径是指从C15化合物(FPP)直接合成ABA的过程。间接途径则是指从C40化合物经氧化分解生成ABA的过程。(Suzuki Masaharu,1998) ABA的钝化与氧化 结合态的ABA:与单糖或氨基酸以共价键结合 钝化与贮藏形式 但干旱所造成的ABA迅速增加并不是来自于结合态ABA的水解，而是重新合成的。 ABA的氧化产物:红花菜豆酸(phaseic acid)(活性低) 二氢红花菜豆酸(dihydrophaseic acid) (无活性) 三、ABA的生理效应 四、ABA的作用机理 图 脱落酸及放线菌素D对大麦糊粉层α-淀粉酶合成的抑制作用糊粉层在0.1μmol·L-1GA溶液中保温11h，此时加入ABA(5μmol·L-1)或放线菌素D(10 μg·L-1)，加入后2.5、5、10h测定α-淀粉酶合成。 §7-5 乙烯(ethylene, ETH) 一、ETH的发现 乙烯(ethylene,ET，ETH):CH2=CH2 MW:28 常温下是气体，轻于空气。 乙烯在极低浓度(0.01～0.1μL·L-1)时就对植物产生生理效应。 种子植物、蕨类、苔藓、真菌和细菌都可产生乙烯。 二、ETH的生物合成 乙烯在植物体内易于移动，并遵循虎克扩散定律。 一般情况下，乙烯就在合成部位起作用。 植物体内远距离运输的形式:ACC 三、ETH的生理