DNA重组技术的应用基本工具汇总.pptVIP

4. 不属于质粒被选为基因运载体的理由是 （ ） A. 能复制 B. 有多个限制酶切点 C. 具有标记基因 D. 它是环状DNA D 继续解答…… 5.在基因工程中，科学家所用的“剪刀”、“针线”和“运载体”分别是 ： 限制性内切酶 DNA连接酶 基因进入受体细胞的载体 思考与探究答案 （2）和（7）能连接形成…ACGT… …TGCA…; （4）和（8）能连接形成…GAATTC… …CTTAAG…; （3）和（6）能连接形成…GCGC… …CGCG…; 1. （1）和（5）能连接形成…CTGCAG… …GACGTC…。 2. 提示： 细菌中限制酶之所以不切断自身NDA，是因为微生物在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制，可以将外源入侵的NDA讲解掉。生物在演化过程中，含有某种限制酶的细胞，其NDA分子中或不具备这种限制酶的识别切割序列，或者通过甲基化酶将甲基转移到识别序列的碱基中上，使限制酶不能将其切开。 3. 提示： 不是任何质粒都可以作为基因工程载体使用，只有满足载体必备的条件的质粒才可以。实际上，在进行基因操作中，真正被用作载体的质粒，都是在天然质粒的基础上进行人工改造的。 提示： 4. 迄今为止，所发现的DNA连接酶都不具有连接单链DNA的能力，至于原因，现在还不清楚，也许将来会发现可以连接单链DNA的酶。 你敢吃这些“转基因”辣椒吗？ 新课导入 　　　角似鹿、鼻似狮、目似虎、 唇似牛、爪似鹰、髭似马、鳞似鱼、身似蛇 呼风唤雨 腾云驾雾 专题一 基因工程 1.1 DNA重组技术的基本工具 教学目标 知识目标 简述DNA重组技术所需三种基本工具及其作用。 认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新。 能力目标 情感态度与价值观 1、关注基因工程的发展前景。 2、了解国内外科研成果，唤起学习积极性。 重点 难点 教学重难点 DNA重组技术所需的三种基本工具的作用。 基因工程载体需要的条件。 基因工程需要哪些基本工具? 基因工程的“专用工具” 一 “分子手术刀” ——限制性核酸内切酶 二 “分子缝合针” —— DNA连接酶 三 “分子运输车” ——基因进入受体细胞的载体 主要是从原核生物中分离纯化出来的一种酶。能将外来的DNA切断，由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的，故名限制性内切酶。 4000种 1、来源： 2、种类： 一、“分子手术刀” —限制性核酸内切酶 3、限制酶切割DNA分子示意图 A P C P G P T P A P C P G P T P 4、限制酶切割的是哪个部位的键? 在特定位点水解磷酸二酯键 一 5、限制酶的作用结果是什么？ 形成黏性末端或平末端 当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切开时，被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。 特点：单链凸出 G//CTTAA AATTC//G 什么叫黏性末端？ ⑴ 当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的DNA两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫平末端。 特点：没有单链凸出 CCC GGG GGG CCC CCC GGG GGG CCC 什么叫平末端？ ⑵ 6、内切酶与解旋酶的区别 DNA连接酶的作用是什么？分为哪两类？DNA连接酶和DNA聚合酶是一回事吗？为什么？ 二、“分子缝合针” —— DNA连接酶 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G EcolⅠ切割 在脱氧核糖与磷酸基之间形成磷酸二酯键 ②从T4噬菌体中分离