高二生物微生物的实验室培养课件.ppt

半固体培养基： 2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方 2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方 3.不管哪种培养基，一般都含有水、碳源、和氮源、 无机盐等营养物质，另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。 1000mL牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成 氢元素、氧元素 H2O定容在1000mL 无机盐 NaCl 5g 氮源和维生素 蛋白胨10g 碳源、磷酸盐和维生素 牛肉膏5g 提供的主要营养 培养基组分 ?4.培养基的用途 ?4.培养基的用途 液体培养基：增菌、工业生产 固体培养基：纯化（分离），　　　　　　鉴定、活菌计数、　　　　　　保藏菌种 三、无菌技术 三、无菌技术 1.无菌技术的概念 　　无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。 1.无菌技术的概念 　　无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。 　　成功地培养微生物的关键。 三、无菌技术 （1）消毒定义： 2.消毒与灭菌的概念及两者的区别 （2）灭菌的定义： （1）消毒定义： 2.消毒与灭菌的概念及两者的区别 （2）灭菌的定义： 3.常用的消毒与灭菌的方法 灭菌的方法： 1.灼烧灭菌 灭菌的方法： 1.灼烧灭菌 灭菌的方法： 2. 干热灭菌： 160-170 ℃下加热1-2h。 3. 高压蒸气灭菌 100kPa、121 ℃下维持15-30min. 1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？ 旁栏思考 1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？ 答：无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。 旁栏思考 2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。 （1） 培养细菌用的培养基与培养皿 （2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管 （3） 实验操作者的双手 2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。 （1） 培养细菌用的培养基与培养皿 （2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管 （3） 实验操作者的双手 答：（1）、（2）需要灭菌；（3）需要消毒。 微生物实验室培养的基本操作程序 1. 器具的灭菌 2. 培养基的配制 3. 培养基的灭菌 4. 倒平板 5. 微生物接种 6. 恒温箱中培养 7. 菌种的保存 四、实验操作 (一)制备牛肉膏蛋白胨培养基(用于培养细菌) 四、实验操作 (一)制备牛肉膏蛋白胨培养基(用于培养细菌) NaCl 5.0g 将上述物质溶解后，添加自来水，定容至1000mL 琼脂 20.0g 蛋白胨 10.0g 牛肉膏 5.0g 牛肉膏蛋白胨固体培养基配方 1．计算、称量 2．溶化 3．调pH：　pH7．6　 4．过滤：这一步可以省去。 5．分装：分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。 6．加塞 7．包扎 操作步骤 8．灭菌: 将50ml培养基用玻棒转移至三角锥瓶中，塞上棉花塞，包上牛皮纸，再放入高压蒸气灭菌锅，在压力为100kPa、温度为121℃，灭菌15～30min。将培养基用旧报纸包裹，放入干热灭菌箱内，在160～170 ℃下灭菌2h。 倒平板技术 1.将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拨出棉塞。 1 2 3 4 倒平板技术 2.右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰。 1 2 3 4 倒平板技术 1 2 3 4 3.用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基(约10~20mL)倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖。 倒平板技术 1 2 3 4 4.等待平板冷却凝固，大约需5~10min。然后，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上。 9．倒平板: 待培养基冷却到50 ℃左右时，在酒精灯附近倒平板。（倒平板操作见课本）2d后观察平板，无杂菌污染才可用来接种. 10．无菌检查： 将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24—48小时，以检查灭菌是否彻底。 1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？ 问题讨论 湖南长郡卫星远程学校 2009年上学期 制作 03 　　是一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称。 一、微生物 微生物 病毒 细菌 放线菌 真菌 原生动物 原核生物界 原生生物界