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CRISPR/Cas9技术的原理及应用;CRISPR-Cas系统的发现;;CRISPR-Cas主要由两部分组成:;;Cas家族;Cas9;CRISPR-Cas系统靶向要求;;;Cas9技术的应用;基因打靶;基因敲除 Knock-out;;基因敲除新技术:Cas9;Cas9与KI;;;调节基因转录的Cas9模式;;;基因打靶小鼠制作流程;Cas9技术进行CKO,KI的优缺点
优点:
经典同源重组局限在于需用胚胎干细胞(Embryonic stem cell)进行重组打靶,Cas9技术突破了打靶技术对物种的限制;
采用Cas9技术进行模型动物制备,所需时间短,最快37天,最慢54天即可确定项目是否能够进行移植,得到F0代鼠时间为3个月;而常规CKO、KI项目得到嵌合鼠时间多为8个月。
缺点:
TALEN、Cas9等进行CKO/KI技术目前仍处于研发测试阶段,目前出现阳性鼠的项目比例为5/25,故目前主推Cas9-CKO/KI可能出现项目不能完成的风险。;Thank You !
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