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15.1 吸光光度法概述15.2 光吸收定律15.3 分光光度计15.4 显色反应和显色条件的选择15.5 吸光度测量条件的选择15.6 吸光光度光法的应用15.1吸光光度法概述 利用溶液颜色的深浅来测定溶液中有色物质的浓度,这种测定方法称为比色分析法。 用分光光度计进行比色分析的方法称为分光光度法。15.1.1光的基本性质 光具有波粒二象性,即波动性、粒子性 描述其波动性的主要参数是:波长λ,频率? ,光速c。三者间关系为:λ? =c根据波长的不同,可分为: 紫外光区:200nm ~ 380nm 可见光区:380nm ~ 760nm 红外光区:760nm ~ 300μm光的粒子性:如光电效应,光的吸收和发射等 即把光看成是带有能量的微粒流,这种微粒叫做光子或者光量子。光的能量(E)决定于光的频率和波长: 具有同一波长的光称为单色光。不同波长组成的光称为复合光。flash/FIG6_4.SWF(flash/FIG6_4.SWF动画flash/FIG6_4.SWF)白光(如日光)是复合光,由380nm~760nm 混合而成。15.1.2物质对光的选择性吸收溶液为什么有颜色,其实质是什么?实验证明,溶液的颜色是由于均匀分布在溶液中的有色化合物的质点选择性的吸收了某种颜色的光所造成的。光的互补 两种颜色的光若按适当比例混合,可以形成白光,这两种光称为互补色光。绿黄青白光青蓝橙红蓝紫动画 如KMnO4吸收绿色光,因此KMnO4溶液呈现紫色。IrIaItIo15.1.3吸收曲线 一束平行单色光照射溶液时,光的一部分被吸收,一部分透过溶液,一部分被器皿的表面反射。Io = Ia + It + Ir 在吸光光度法中,测定时都是采用同样质量的比色皿,反射光的强度基本上是不变的,其影响可以相互抵消。 空白调零分光光度法中:Io = Ia + It 透过光强度It与入射光强度Io之比称为透光度或透光率。用 T 表示:或从上式可以看出:溶液的透光度愈大, 说明溶液对光的吸收愈小,浓度低;相反,透光度愈小, 说明溶液对光的吸收愈大,浓度高。 吸光度A:若光全部透过溶液,Io= It , A = 0 。若光几乎全被吸收,It ≈ 0, A = ∞。 吸光度A也可以用来衡量溶液中吸光物质对波长为λ的单色光的吸收程度,值越大,其吸收程度越大,透光率越小;反之亦然A A、B、C、D代表不同浓度下的吸收曲线。1.6D1.2C0.8B0.4A400480560640720 nmKMnO4 溶液的吸收曲线 将不同波长的光透过某一固定的溶液,测量不同波长下溶液对光的吸光度,作图,flash/xishouquxian.swf图flash/xishouquxian.swf15-2吸收曲线的讨论(1)同一种物质对不同波长光的吸光度不同。吸光度最大处对应的波长称为最大吸收波长λmax。(KMnO4的?最大 = 525 nm) (2)不同浓度的同一种物质,其吸收曲线形状相似λmax不变。而对于不同物质,它们的吸收曲线形状和λmax则不同。可作为物质定性分析的依据之一。(3)不同浓度的同一种物质,在某一定波长下吸光度 A 有差异,A 随浓度的增大而增大 。此特性可作为物质定量分析的依据。(4)在λmax处吸光度随浓度变化的幅度最大,所以测定最灵敏。吸收曲线是定量分析中选择入射光波长的重要依据。15.1.4吸光光度法的特点:1、灵敏度高,下限为10-5~10-6 mol·L-1。适于微量分析。2、准确度较高,相对误差为2% ~ 5%。3、操作快速简便,易于掌握。4、应用广泛。15.2溶液对光的吸收定律15.2.1溶液对光的吸收定律 实验证明:若保持入射光的波长不变,溶液对光吸收的程度与溶液的浓度、液层厚度有关。一、朗伯定律:当 ?、c、T 一定时,溶液的吸光度与液层的厚度成正比。flash/bierdinglv.swf动画数学表达式:K1:比例常数,与?、c、T有关。b:溶液厚度二、比尔定律比尔定律:当 ?、b 和 T一定时,溶液的吸光度与溶液的浓度成正比。flash/bierdinglv2.swf动画数学表达式:A = K2 c三、朗伯—比尔定律(同时考虑溶液浓度和液层厚度的影响)一束平行单色光通过溶液,当?和T一定时,其吸光度与溶液的浓度和液层厚度成正比。数学表达式: A = K b c适应范围广。四、比例系数K1、吸光系数a 当c用g·L-1表示,b用cm表示时,K用a表示,称为吸光系数,其单位为 L·(g.cm)-1 ,则:A = a b c a是吸光物质在一定的条件下的特性常数,与本性有关,与吸光物质的浓度和液层厚度无关。2、摩尔吸光系数ε c用mol·L-1表示,b用cm表示时,K用ε表示,称为摩尔吸光系数,其单位为L·(mol.
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