植物体细胞杂交上传.pptxVIP

（二）植物体细胞杂交1、概念： 将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的方法。 Q1.不同植物的体细胞完成融合，遇到的第一个障碍是什么？ Q2.怎样才能去除细胞壁但又不破坏细胞的生命活性呢？纤维素酶和果胶酶，酶解法除去细胞壁的植物细胞叫做原生质体。Q3.原生质体如何融合在一起呢？资料1：经漫长的进化过程，有性杂交中精子与卵细胞能够自然发生融合形成受精卵，而体细胞的原生质体不能自然发生融合，因而需要人工诱导迫使二者融合。受精作用Q4.融合常用的融合方法？物理方法：离心、振荡、电刺激化学方法：聚乙二醇（PEG）电刺激融合资料2：聚乙二醇（PEG)分子能改变各类细胞的生物膜结构，使两细胞接触点处质膜的脂类分子发生疏散和重组，从而使细胞发生融合，形成杂种细胞。Q5.融合可能的类型？怎样筛选杂种细胞？Q6.两个原生质体能发生融合，这与细胞的什么特性有关？细胞膜的流动性原生质体的融合植物体细胞杂交的过程Q7.植物体细胞杂交成功的标志是什么？Q8.如何检测细胞壁的存在？到此，是否意味着植物体细胞杂交就完成了呢？Q9.如何将杂种细胞培育成杂种植株？植物体细胞杂交的过程Q10.利用杂种细胞获得杂种植株所依据的原理？植物细胞的全能性植物细胞A植物细胞B酶的 专一性去壁去壁植物细胞融合原生质体A原生质体B生物膜的 流动性融合2、过程及原理融合的原生质体AB再生细胞壁植物组织培养杂种细胞AB脱分化植物细胞具全能性愈伤组织再分化 杂种植株3.植物体细胞杂交的成果白菜甘蓝白菜－甘蓝成果：烟草－海岛烟草；胡萝卜－羊角芹；Q11.获得的杂种植株是否能表现出人们所期望的性状？为什么番茄-马铃薯既没有结番茄，也没长马铃薯？基因的表达不是孤立的，它们之间是相互调控、相互影响的，两份遗传物质的表达受到相互干扰，所以不能再像马铃薯或番茄植株中的遗传物质一样有序表达。4.意义 克服了不同生物远缘杂交不亲和的障碍（生殖隔离），提供了创造新物种的可能。细胞膜的接触：当原生质体置于电导率很低的溶液中时，电场通电后，电流即通过原生质体而不是通过溶液，其结果是原生质体在电场作用下极化而产生偶极子，从而使原生质体紧密接触排列成串； 膜的击穿：原生质体成串排列后，立即给予高频直流脉冲就可以使原生质膜击穿，从而导致两个紧密接触的细胞融合在一起并圆球化。 这体现了细胞的哪个特点在细胞工程中普遍认为聚乙二醇（PEG)分子能改变各类细胞的生物膜结构，使两细胞接触点处质膜的脂类分子发生疏散和重组，由于两细胞接口处双分子层质膜的相互亲和以及彼此的表面张力作用，从而使细胞发生融合，从而形成杂种细胞，培养该杂种细胞（细胞质杂种）可以获得一些特殊的杂种植株。 PEG诱导融合的特点：优点是融合成本低，勿需特殊设备；融合子产生的异核率较高；融合过程不受物种限制。缺点是融合过程繁琐，PEG可能对细胞有毒害。? PEG作用机理： Kao等认为，由于PEG分子具有轻微的负极性，故可以与具有正极性基团的水、蛋白质和碳水化合物等形成H键，从而在原生质体之间形成分子桥，其结果使原生质体发生粘连进而促进原生质体融合；另外，PEG能增加类脂膜的流动性，也使原生质体的核、细胞器发生融合成为可能。思考：原生质体的融合是哪一部分的融合？这实现了什么？