临床常见标本的细菌学检验.pptxVIP

微生物学检验第十九章临床常见标本的细菌学检验 返回总目录第一节 概述 第二节 临床常见标本的细菌学检验12本 章 内 容学习目标及重点 学习目标：掌握临床常见标本的采集、送检和处理的原则临床常见标本细菌学检验程序、检验方法及结果报告熟悉TAT、危急值在临床实际工作中的应用临床标本常见病原菌的检验方法及鉴定要点了解临床标本细菌学检验的临床意义临床标本中正常菌群的分布及常见致病菌本章重点： ★病毒标本采集和运送原则★病毒学诊断及鉴定常用方法★病毒培养的基本操作第一节 概述一、临床标本的采集、送检与处理原则 （一）临床标本的采集 1.核对检验单信息 ? 信息完整、无误 2.选择适当的容器第一节 概述 3.早期采集 ? 使用抗菌药物前 4.无菌采集 ? 严格无菌操作技术第一节 概述 5.选择采集部位和方法第一节 概述 6.充足的标本量 ? 足量、适量 7.标记标本 8.归放标本 ? 符合生物安全防护要求第一节 概述（二）临床标本的保存和送检 ? 立即送检，否则应放入运送培养基或保存液中运送 1.普通细菌培养标本 ?室温：1小时，4℃：24小时，运送培养基：48小时 2.苛养菌培养标本 ?保温、保湿送检，“床头接种”第一节 概述3.厌氧菌培养标本 ?防干燥，避免接触空气。4.安全运送 ?注意安全防护 ?高致病性传染病标本，按生物安全有关规定包装，由专人运送第一节 概述（三）临床标本的处理 ?核对标本与申请单信息常见标本处理方式 组织：无菌粉碎研磨后，加生理盐水制成悬液，接种体液：3000r/mim离心10分钟后，接种。棉拭子：置运送培养基送检，避免污染。粪便：挑取带脓、血及黏液部分接种。痰液：检查标本是否有血液、脓液、颗粒、干酪样物等血液：采集后立即增菌培养厌氧菌培养：检查标本、运送方式是否适合厌氧培养，立即接种 第一节 概述二、培养基及培养方法的选择 1.培养基 选择恰当的培养基或组合第一节 概述2.常用培养方法 ?需氧培养、二氧化碳培养和厌氧培养电热恒温培养箱二氧化碳培养箱厌氧培养箱第一节 概述三、细菌学检验的基本流程（一）细菌学检验的基本程序 第一节 概述（二）细菌学检验鉴定步骤1.标本性状观察 ?颜色、是否粘稠、是否浑浊、是否脓性、是否带血等性状 第一节 概述 2.涂片检查 ?不染色标本检查 ：检查细菌的动力 ?染色标本检查革兰染色抗酸染色墨汁染色第一节 概述 3.细菌的分离培养 ?目的：得到单个纯菌落 ?甄别污染菌方法 ①观察菌落是否在划线上 ②观察菌落是否与直接涂片染色结果相符 ③观察菌落是否符合拟培养细菌的生长特点 ④注意培养时间第一节 概述4.细菌的鉴定?选择细菌检验鉴定方法的原则★选择有鉴定价值的试验：两种细菌出现不同的结果★选择快速、简易的试验：如触酶、氧化酶 ★综合考虑试验的敏感性和特异性 第一节 概述5.细菌对抗菌药物敏感性试验 ?纸片扩散法 ?肉汤稀释法 ?自动化仪器法 ?E-test法等。第一节 概述四、细菌学检验报告原则?标本周转时间（TAT）：从标本采集起到临床医生收到检验结果的时间?危急值：指危及到患者生命健康安全的检验结果 检验报告原则?初报告?预报告?最终报告?报告抗菌药物敏感性试验结果返回本章内容第二节 临床常见标本的细菌学检验一、血液及骨髓标本的细菌学检验（一）标本的采集 1.皮肤消毒 ?严格执行三步法 2.采血部位： ?肘静脉 ?肘动脉或股动脉采血 ?婴幼儿采颈静脉血 第二节 临床常见标本的细菌学检验3.采集方法 ?严格无菌操作 4.采血量 ?比例：1:10 ?成人8～10ml/瓶 ?儿童1～5ml/瓶 ?婴儿1～2ml/瓶 ?骨髓1～2ml/瓶 第二节 临床常见标本的细菌学检验5.采血时间和頻度疾病24小时内24小时后菌血症、败血症2～3份细菌性心内膜炎3份（1～2小时）2份不明原因发热2～3份2份6.标本的运送和保存 立即送检，室温保存，切勿冷藏第二节 临床常见标本的细菌学检验（二）微生物学检验 1.常见病原菌 第二节 临床常见标本的细菌学检验2. 检验程序第二节 临床常见标本的细菌学检验3.检验方法 （1）普通细菌的培养与鉴定 ?增菌培养：培养阳性指证及疑似菌列表培养基性状改变疑似病原菌均匀混浊，指示剂变色革兰阴性杆菌微混浊，有绿色变化肺炎链球菌有菌膜，均匀混浊有绿色荧光铜绿假单胞菌上层澄清，下层有沉淀链球菌细胞层自上而下的溶血溶血性链球菌混浊、有胶冻状凝固现象葡萄球菌灰白色菌膜、培养基清晰枯草芽孢杆菌或类白喉棒状杆菌涂片染色镜检报告阳性培养瓶直接药敏试验报告分离培养细菌鉴定药敏试验报告第二节 临床常见标本的细菌学检验?阳性培养瓶处理?阴性培养瓶处理 于12～18小时、第3天和第7天至少做3次盲传，7天无细菌生长报告阴性胰胨肉汤或专业培养瓶血液骨髓第二节 临床