基因工程专题1-2课件.pptVIP

反转录人工合成互补DNA, cDNA 构建基因文库获取目的基因存在的问题—— 费时费事 内含子序列 反转录人工合成互补 DNA方法的优势—— 获取的DNA片段往往是具有特定功能的目的基因 聚合酶链式反应（PCR） PCR技术是聚合酶链式反应的缩写。是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。 加入4种物质： （1）作为模板的DNA序列； （2） DNA引物（20个左右碱基的短DNA单链，与被分离的目的基因两条链各自5’端序列相互补）； （3）TaqDNA聚合酶； （4）dNTP（dATP, dTTP, dGTP和dCTP）。 （5）能量ATP 聚合酶链式反应（PCR） 变性、退火、延伸三步曲 高温变性：双链DNA解链成为单链DNA 低温退火：部分引物与模板的单链DNA的特定互补部位相配对成双链 适温延伸：以目的基因为模板，合成互补的新DNA链 聚合酶链式反应（PCR） 每一轮聚合酶链式反应可使目的基因片段增加一倍 30轮循环可获得—— 230（1.07×109)个基因片段 PCR(多聚酶链式反应) 基因的结构 选修3现代生物科技专题 王天宝 Tel:0668-3123115 E-mail:wtianbao72@163.com 专题1 基因工程 DNA重组技术的基本工具 基因工程的基本操作程序 基因工程应用