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- 2020-02-20 发布于天津
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专题14 现代生物科技专题
一、基因工程和蛋白质工程
1.掌握基因工程的3种工具:
(1)限制性核酸内切酶:识别特定核苷酸序列,并在特定位点切割DNA分子,切开磷酸二酯键,产生黏性末端或平末端。
(2)DNA连接酶:连接两个DNA片段形成磷酸二酯键。
(3)载体:有质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。
2.掌握基因工程的操作流程:
(1)获取目的基因的3种途径:
①从基因文库中获取。
②利用PCR技术扩增。
③通过化学方法人工合成。
(2)基因表达载体的构建:
①目的基因。
②启动子:RNA聚合酶识别和结合部位,驱动基因转录。
③终止子:RNA聚合酶脱离部位,终止转录。
④标记基因:鉴别受体细胞中是否导入含有目的基因的基因表达载体。
(3)将目的基因导入受体细胞:
导入方法根据生物的种类不同而不同:
①植物:农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法。
②动物:显微注射技术(导入受精卵)。
③微生物:感受态细胞法(Ca2+处理)。
(4)目的基因的检测与鉴定:
①检测目的基因是否导入受体细胞:DNA分子杂交技术。
②检测目的基因是否转录出mRNA:分子杂交技术。
③检测目的基因是否翻译成蛋白质:抗原-抗体杂交技术。
④个体生物学水平鉴定:根据表达性状判断。
3.PCR技术:
(1)原理:DNA双链复制。
(2)条件:引物、DNA模板、TaqDNA聚合酶、四种脱
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