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实验_检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质.ppt

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斐林试剂与双缩脲试剂的比较: A液:0.1g/mLNaOH B液:0.01g/mLCuSO4 甲液:0.1g/mLNaOH 乙液:0.05g/mLCuSO4 紫色物质生成 砖红色沉淀 先加A液,再加B液,不需加热 甲液与乙液先混再用,且现配现用,需加热 蛋白质 还原性糖 试剂组成 检验结果 试剂用法 检测对象 双缩脲试剂 斐林试剂 * 比较项目 斐林试剂 双缩脲试剂 不 同 点 使用方法 甲液和乙液混合均匀后方可使用,且现配现用 使用时先加A液再加B液 反应条件 需50-65℃水浴加热 不需加热即可反应 反应原理 还原糖中的醛基被Cu(OH)2 悬浊液氧化,Cu(OH)2被还原为砖红色Cu2O沉淀 具有两个以上肽键的化合物在碱性条件下与Cu2+反应生成紫色络合物 颜色 砖红色 紫色 浓度 乙液CuSO4浓度为0.05 g/mL B液CuSO4浓度为0.01g/mL 相同点 都含有NaOH、CuSO4两种成分,且所用NaOH浓度都是0.1g/mL 斐林试剂与双缩脲试剂都由NaOH和CuSO4组成,但二者有如下三点不同: ①溶液浓度不同。斐林试剂中NaOH的浓度为0.1g/mL,CuSO4的浓度为0.05g/mL;双缩脲试剂中NaOH的浓度为0.1g/mL,CuSO4的浓度为0.01g/mL。 ②使用原理不同。斐林试剂实质是新配制的Cu(OH)2溶液;双缩脲试剂实质是在碱性环境下的Cu2+。 ③使用方法不同。使用斐林试剂时,先把NaOH溶液和CuSO4溶液混合,然后立即使用。使用双缩脲试剂时,先加入NaOH溶液,然后再加入CuSO4溶液。 淀粉的检测和观察: 取材: 马铃薯匀浆 检测 组织样液2mL 碘液2滴 结论: 说明组织样液中存在淀粉。 注意: 常用材料:马铃薯 试剂: 。颜色变化: 。 碘液 变蓝 摇匀后变成蓝色 * 四种物质颜色反应的对比 还原糖 蛋白质 淀粉 脂肪 * 下列关于实验操作步骤的叙述中,正确的是 A.用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液,可直接用于蛋白质的鉴定 B.脂肪的鉴定需要用显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪滴 C.鉴定可溶性还原糖时,要加入斐林试剂甲液摇匀后,再加入乙液 D.用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂A液与B液要混合均匀后,再加入含样品的试管中,且必须现配现用 ( ) B * 知识回顾Knowledge Review 祝您成功! 实验1:检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 一.实验原理: 某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。如: ①.还原性糖的鉴定: 还原性糖+ ②.脂肪的鉴定:     脂肪+ 脂肪+     ③.蛋白质的鉴定: 蛋白质+ ④淀粉 + 斐林试剂 砖红色沉淀 苏丹Ⅲ染液 橘黄色 苏丹Ⅳ染液 红色 双缩脲试剂 紫色 碘 蓝色 * 二.目的要求: 尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质 1、还原糖的检测和观察: 选材 应该选择含 量高.颜色为 以苹果.梨为最好。 糖 白色或近于白色 制备组织样液: 制浆 过滤 取液 三.实验过程: 用一层纱布 的植物组织, * 可溶性还原糖与斐林试剂在加热的过程中生成砖红色沉淀,说明植物组织样液中含有还原糖。 注入2mL苹果组织样液 注入1mL刚配制好的斐林试剂 水浴加热约2min 呈色反应 变成砖红色 50----650C的温水 结论: 甲乙液等量混匀现配现用 振荡、混合摇匀呈现蓝色 * ①还原糖有 。 ②试剂: . (甲液:0.1g/ml 的 , 乙液:0.05g/ml的 .) 甲乙液必须 后再加入样 液中, 。 ③必须 。 葡萄糖,果糖,麦芽糖 用水浴加热 斐林试剂 NaOH CuSO4 等量混合均匀 现配现用 注意事项: ④颜色变化: 浅蓝色 棕色 砖红色 * 思考: 1.为什么加入斐林试剂甲液和斐林试剂乙液时必须混合后再加入? 因为若先加入NaOH溶液,还原性糖中的还原性半缩醛羟基易被氧化而失去还原性,再加入CuSO4溶液后不能产生Cu2O砖红色沉淀,只

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