分子荧光分析法简介.pptxVIP

《仪器分析实验》分子荧光分析法Molecular FluorimetryFor short: M-F一、分子荧光分析法简介(对光的吸收)1.1 荧光的产生激发态能量的跃迁与转 化的形式和速率：A1,A2 吸收: 10-15 sVR 振动松弛：? 10-12 sic 内转化：? 10-11 sisc 系间窜越： 10-6 ~ 10-2 sF 荧光： 10-9 ~ 10-6 sP 磷光： 10-6 ~ 100 s发生激发态反应分子内的激发和衰变过程1.2 荧光光谱任何荧光化合物，都具有两种特征的光谱：激发光谱和发射光谱。激发光谱发射光谱组成、结构与衍化信息☆ 物质的化学结构☆ 环境与介质条件☆ 与其它溶质的相互作用☆ 反应动力学1.3 荧光定量F = K﹒I0﹒φf﹒C I0：光源强度；φf：荧光量子产率；C：荧光体浓度）（☆注意：在一定浓度范围内适用）?问题：1）影响相对荧光强度的因素有哪些？2）试比较荧光法与紫外-可见分光光度法的分析性能。1.4 荧光仪的基本构造？问题：荧光光度计与紫外-可见分光光度计在光路设置 上有什么不同？为什么？1.5 分子荧光分析法的应用简介★ 常规分析应用： ☆ 定性分析：φf；λex；λem；峰形等 ☆ 定量检测： F = K﹒I0﹒φf﹒C ☆ 其它（略）★ 高端生化研究： ☆ 分子相互作用研究； ☆代谢动力学跟踪； ☆ 显微成像（物理迁