血清谷丙转氨酶测定ppt的设计实验.pptVIP

* * 血清谷丙转氨酶活性的测定 实验题目 实验目的 掌握谷丙转氨酶活性测定的 原理和方法 血清谷丙转氨酶作用于由丙氨酸及a一酮戊二酸组成的基质。产生丙酮酸及谷氨酸 血清加基液保温后产生丙酮酸的多少，即反应出谷丙转氨酶活性的大小。 丙酮酸与2，4-二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙，在酸性溶液中显黄色，在碱性溶液中成醌型显棕红色。 实验原理 本实验是在碱性条件下，生成醌类化合物的量反应丙酮酸的量，即反应了谷丙转氨酶的活性。 本法以lml血清与基质液在37℃，保温30分钟生成2.5μg丙酮酸为谷丙转氨酶活性1单位 求酶活性单位的方法： 1、标准品对照法：检品与标准丙酮酸液同样处理呈色，进行比色，计算出酶活性单位。 2、标准曲线法：取含待测物的一系列标准溶液，作标准曲线，由标准曲线查得活性单位。 一、标准品对照法 取试管4支，标号，按下表加试剂： 实验操作 56℃放置5分钟。 加0.4N NaOH液5.0ml 慢慢加入（约1分钟），边加边混匀。 室温放置 30分钟， 测OD值，波长 520nm，用蒸馏水调零点。 计 算 （ODA-ODB） （ODs-ODs＇） = X （待测样品丙酮酸含量） 50ug/ml × 0.1 ml X = （ODA-ODB） （ODs-ODs＇） × 5 SGPT单位=