亮氨酸氨基肽酶检测.pptxVIP

亮氨酸氨基肽酶检测亮氨酸氨基肽酶 LAP是一种蛋白酶，LAP广泛分布于人体各组织，以肝、胆、肾、小肠以及子宫肌层内含量最多。肝内外胆淤时，LAP活力显著增高，尤其在恶性胆淤时，其活力随病情进展而持续增高。对肝道梗阻及胰腺癌的诊断有价值。【检测方法】 一般采用L-Leucine-p-nitroanilide作为底物通过LAP水解，通过检测P-nitroaniline来测定LAP的活性，此方法在六十年代即为推荐方法。 【原理】 L-亮氨酸－p-硝基苯胺被标本中的LAP分解，游离出L-亮氨酸－p-硝基胺，在405nm处检测吸光度变化率，测得LAP活性值。 亮氨酸氨基肽酶【试剂】Tris缓冲液100 mmol/LL-亮氨酸－p-硝基苯胺2mmol/L【操作参数】主波长405nm副波长505nm温度37℃分析类型 速率法样本/试剂10/300延迟时间/检测时间3/2 在检测时间内读取两次不同时间的吸光度用其差值进行计算。亮氨酸氨基肽酶【计算】【计算因子说明】ΔA/min----每分钟吸光度变化率 e--------- 摩尔消光系数Vt-----------反应液总体积 (ml) Vs------- 标本体积 (ml)1000--------变化因数d--------- 1比色杯光径 (cm)F*-------- 3100 理论因数【正常值】血清LAP