《病毒学》第6章 病毒粒子的装配和释放.ppt

* 空泡释放 病毒粒子在空泡内形成聚集，产生病毒空泡，病毒空泡位于细胞膜附近，并通过接触细胞膜而破裂，随之释放出病毒粒子。 细胞本身并不破裂,也可持续释放病毒 一般无包膜，多在细胞质中装配和积累。 * 一般而言，病毒有自身特定的释放方式 但也能不同的方式进行释放 如疱疹病毒:内质网管腔释放 相邻细胞之间的膜融合 植物病毒:胞间连丝 * 目前有关病毒粒子装配的知识主要来自体外的病毒重建实验，即是将一个病毒粒子拆开为核酸基因、结构蛋白两部分，然后在一定的条件下进行体外重新组合，形成完整的具有感染性的病毒粒子，由此可以了解病毒粒子的装配过程。 * 脚手架蛋白：具有瞬时功能，但不结合入病毒体结构中。一旦病毒装配成熟，脚手架蛋白便从病毒结构中除去，或是被水解，或是参与另一轮的病毒装配。 具有蛋白水解的切割作用。蛋白质切割是指导病毒壳体装配的另一种方式。 大的前体蛋白经过切割加工，装配，一般认为，这种广泛发生于病毒装配过程中的蛋白质的翻译后切割作用，能够稳定装配步骤。 * * 装配起始 TMV-RNA与双盘结合时，首先是“起始环”插入到双盘的中央孔中，然后“起始环”顶端的核苷酸序列与蛋白亚基相结合，一旦TMV-RNA牢固地结合在双盘结构中，TMV就完成了病毒粒子的装配起始过程。 装配延伸 TMV装配的第二个阶段是由另外的双盘或A蛋白结合到TMV-RNA与第一个双盘所形成的装配起始复合物中，直到整个TMV-RNA分子被双盘全部覆盖住。 体内如何装配的了解甚少。究竟在体内是否也有双盘结构不清楚。 * T4噬菌体的装配研究表明，DNA噬菌体复制时，病毒颗粒核酸和壳体蛋白分别合成后并不立即进行装配，而是积累在细胞内形成前体池中，当前体池中的核酸和蛋白质浓度达到一临界值时才随机地进行装配。 噬菌体T4的壳体装配过程是通过三个独立的亚装配途径进行的，分别产生了噬菌体的头部、无尾丝的尾部和尾丝，然后这些结构自发地装配成壳体。 * 大多数烈性噬菌体(virulent phage)随着宿主细胞的裂解(lysis)，其成熟的噬菌体能够迅速地从宿主细胞中释放出来。 机制：当噬菌体在细胞内成熟并积累到一定量之后，宿主细胞膜的通透性就会发生改变，从而使细胞因吸水膨胀而破裂死亡，导致成熟噬菌体释放。 一些动物病毒如脊髓灰质炎病毒、脑心肌炎病毒等侵染细胞后也能导致细胞自溶，释放出病毒粒子，细胞溶解的机理同噬菌体一致。 * 首先病毒包膜糖蛋白在宿主粗面内质网的附着核糖体上合成，合成后随即进入内质网腔，并插入到内质网或高尔基膜上，最后转运到细胞膜，导致细胞膜结构的重排。 当病毒核衣壳贴近该处的细胞膜时，使得该处含有病毒包膜糖蛋白的细胞膜包裹病毒核衣壳，形成一个芽状结构，随后这一芽状结构逐渐伸出，两侧的细胞膜融合，释放出有包膜的病毒粒子。 * 第六章 病毒粒子的装配和释放 * 第一节 病毒粒子的装配 定义：在病毒感染的细胞中，由病毒基因组指导合成的病毒结构蛋白和子代病毒核酸基因组组装，生成完整的子代病毒粒子的过程称为装配(assembly)或叫做成熟(maturation)。 * 第一节 病毒粒子的装配 2.部位 真核DNA病毒:细胞核 RNA病毒:细胞质 装配效率：复杂的过程，效率不高 DNA噬菌体:50％的DNA和结构蛋白不能组装。 * 装配错误，出现空壳体或其它畸形颗粒。 病毒混合感染，装配错误可能产生： 具有不同病毒结构蛋白构成的壳体、包膜病毒。 一种病毒基因组被包闭在另一种病毒编码的外壳中形成假型病毒。 3)将宿主的核酸包被进去。 * 研究方法：体外的病毒重建实验 将一个病毒粒子拆开为 核酸基因 结构蛋白 在一定的条件下进行体外重组形成具有感染性的病毒粒子。 * 2010年8月27日 Science UCLA大学（加利福尼亚洛杉矶分校）分子和医学药理学Lily Wu教授试图操纵腺病毒用于基因治疗，“我们操纵病毒，传递基因用于治疗癌症，但先前的显微技术无法看见修饰过的病毒，这就像在黑暗中组装汽车一样，检验组装是否正确的唯一方法就是开动汽车进行试验。” UCLA大学微生物学免疫学分子遗传学教授Hong Zhou求助。Zhou使用低温电子显微镜技术制作出了准确的病毒原子分辨三维生物模型,水中的样本可直接成像。 （Science DOI: 10.1126/science.1187433） * Fig. 1. Overall structure of the Ad5 capsid. (A) Radial