血浆凝血酶原时间测定(手工法).docVIP

血浆凝血酶原时间测定(手工法) 1.检验原理 凝血过程是通过适量的凝血活酶、钙离子和孵育血浆触发，然后测定纤维蛋白凝块形成时间。PT的长短反映了血浆中凝血酶原、纤维蛋白原和因子Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ的水平，本试验是外源性凝血系统常用的筛选试验。 2.导致PT检测过高原因 标本自身高和用药后高（比如肝素），抽血过程中抗凝剂未充分混匀或者抗凝剂失效，加了肝素的针头抽出的血液放入血凝管送检。 3.手工适用状态 当标本在血凝仪器CA1500上血浆凝血酶原时间未能检测出来，测量状态为●完成，数据显示错误报警ERR032（无凝结物），对标本和试剂进行全面评估后，怀疑是血浆凝血酶原时间太长（100S）（排除非自身原因），立即采用手工操作测定凝血酶原时间。 4.检验方法 4.1．试剂准备：按照试剂瓶标签上标明的量（4mL），用去离子水复溶ThromborelS试剂，颠倒混匀8~10次，使用前用水浴箱预温到37℃5分钟，也可直接使用CA1500上的PT（经水浴箱37℃ 4.2．检验步骤及方法：3000r/min离心标本10分钟，用加样枪吸取血浆100uL到小塑料试管37℃孵育1分钟，加Thromborel S 试剂（已预温到37℃）200uL并同时开启秒表计时，不断轻轻倾斜试管，记录至液体停止流动所需要的时间，记录时间，重复以上操作 5.结果计算 在LIS系统上输入该患者的凝血酶原时间，其它根据下列公式计算： 凝血酶原活度（PTA）=[（对照PT﹣对照PT*0.6）÷（患者PT-对照PT*0.6）] *100% 凝血酶原比值（PTR）=患者PT/对照PT 国际标准化比值（INR）= PTRISI 6.报告 确定无误后及时报告危急值，并在LIS上输入计算出来的结果，在备注栏中注明“手工法结果”，审核报告发出。 7.标本存放 1小时内（3000r/min*10min）分离血浆，室温放置不超过2小时，2~8℃保存不超过4小时，长时间保存需在冰冻条件下，（-70℃不超过6个月），只能冻融1次，在37℃ 8．试剂储存条件及有效期 未开封的Thromborel S 试剂2-8℃储存，有效期24个月。复溶试剂的稳定性：37℃（已开瓶）8小时 ， 15-25℃（已开瓶）2天，2-8 注意试剂有效期限：质控品的测定值不在其指定范围之内，即表示试剂失效。 9．参考文献 9.1.叶应妩.王毓三等《全国临床检验操作规程》第三版，东南大学出版社。 9.2. SIEMENS 凝血酶原试剂说明书。 9.3.日本Sysmex CA1500全自动血凝分析仪中文手册。