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选修 3 复习提纲
选修 3 复习提纲
一、 基因工程
1、 (a)基因工程的诞生
(一)基因工程的概念
基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外DNA重组和转基因技术,赋予生物以新的遗传特性,
创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在 DNA分子水平上进行设计和施工的,又叫做
DNA重组技术。
2、 (a)基因工程的原理及技术
原理:基因重组
技术: (一)基因工程的基本工具
1. “分子手术刀”——限制性核酸内切酶 (限制酶)
(1)来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。
(2)功能:能够识别双链 DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的
磷酸二酯键断开,因此具有专一性。
(3)结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端。
2. “分子缝合针”——DNA连接酶
(1)两种 DNA连接酶 (E·coliDNA连接酶和 TDNA连接酶)的比较:4
①相同点:都缝合磷酸二酯 键。
②区别:E·coliDNA连接酶来源于 T 噬菌体,只能将双链 DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来;4
TDNA 两种末端 低
而 4 连接酶能缝合 ,但连接平末端的之间的效率较 。
(2) DNA :DNA 单个核苷酸 DNA
与 聚合酶作用的异同 聚合酶只能将 加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键。
连接酶是连接两个DNA片段的末端,形成磷酸二酯键。
3. “分子运输车”——载体
(1)载体具备的条件:①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点,供外源DNA片段插入。
③具有标记基因,供重组DNA 的鉴定和选择。
(2)最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外,并具有自我复制能力的双
链环状DNA分子。
3 噬菌体的衍生物、动植物病毒
()其它载体:
( )
二 基因工程的基本操作程序
第一步:目的基因的获取
1.目的基因是指: 编码蛋白质的结构基因 。
2. 直接分离 人工合成 反转录法_ 化学合成法_
原核基因采取 获得,真核基因是 。人工合成目的基因的常用方法有 和 。
1
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3.PCR技术扩增目的基因
1 DNA双链复制
()原理:
2 90 95 DNA解链 55 60 引物结合到互补DNA链
()过程:第一步:加热至 ~ ℃ ;第二步:冷却到 ~ ℃, ;第三步:
70 75 热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成
加热至 ~ ℃, 。
第二步:基因表达载体的构建
1.目的:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传至下一代,使目的基因能够表达和发挥作用。
2.组成:目的基因+启动子+终止子+标记基因
1 DNA片段 首端 RNA聚合酶
()启动子:是一段有特殊结构的 ,位于基因的 ,是 识别和结合的部位,能驱动基因
转录出mRNA,最终获得所需的蛋白质。
(2)终止子:也是一段有特殊结构的 DNA片段 ,位于基因的尾端。
(3)标记基因的作用:是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用
的标记基因是抗生素基
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