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IMAGE J灰度分析
DNA 灰度分析
方法1
1.首先打开软件后,开启图档;
2.请先做校正,选择Analyze底下的Calibrate选项,再选择校正的模式,使用Uncalibrate OD,再按ok ;
3.在要分析的第一条(first lane)加上一个长型框(工具列第一个选项),再按下Analyze/Gels/select first Lane快速键(Ctr+1),此时框架中会出现一个号码1,之后可以移动框架到第二个lane再选择Analyze/Gels/select second Lane快速键(Ctr+2),当然可以一直加下去,最后按Analyze/Gels/plot Lanes快速键(Ctr +3);
4.分析以后会出现图型表示你刚选择的框内的影像强度,此时可以看到有几个比较高的区段,就是我们想定量的band,使用直线工具(工具列第五个选项)先将图形中高点为有band的区域和没有band的区域分开再,使用魔术棒工具(工具列第八个选项)点选要分析的区域;
5.当我们点选分析时,在result的对话视窗会出现分析的数据,依序点选就会出现每个band的值。
方法2
1.打开图
2.选择要分析的条带,Ctrl+M测
WB灰度分析
1. 打开文件;
2. 把图片转化成灰度图片:ImageType 选8-bit;
3. 消除背景影响:ProcessSubtract Background. 选择50基本可以。
4. 设置定量参数: AnalyzeSet Measurements, 点击面积,平均密度,和灰度值及Integrated Density;
5. 设置单位 AnalyzeSet Scale,在“Unit of length” 边的方框里输入 pixels;
6. 把图片转换成亮带,EditInvert ;
7. 选择Freehand Selection;尽量把条带圈起来; 点击键盘m,出来IntDen灰度值;
8. 用“Freehand Selection”选择下一条带,按m进行测量。
11. 当测定完所有条带,选结果中的“Edit ”的“Select All”,然后复制数据“IntDen”到Excel表即可进行分析。
Merge
1. 打开文件;
2. Image – color – merge channels;
3. 同样的要把输出的彩色图像名字为composite 类型变为RGB color Iamge --type --RGB color;
4.然后ctrl+S保存就可以了。
测面积
放大图片,freehand工具圈住要测的部分,按M测量,Area即面积。
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