Q_SDHSSW006-2019重组乙肝疫苗.pdf

山东华思生物科技有限公司企业标准 Q/SDHSSW006-2019 重组乙肝疫苗 2019-12-26 发布 山东华思生物科技有限公司发布 自我承诺 我司编写并公开的 Q/SDHSSW006-2019 《重组乙肝疫苗》规定的内容均符合 国家有关法律法规、强制性标准及相关产业政策的要求，并按照规定程序由企业 法人代表批准发布。 我司生产的产品均符合本标准规定的各项技术要求，标准编号在相应的产品 包装上明示。 我司保证本标准真实、合法、有效，对本标准实施的后果承担全部法律责任。 山东华思生物科技有限公司 2019 年12 月26 日星期四15:30:00 Q/SDHSSW006-2019 重组乙肝疫苗 一、范围 本标准规定了重组乙肝疫苗制备方法、检定方法和标准、保存、运输及有效期 等。 本标准适用于重组乙肝疫苗的制造与检定。 二、规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是标注日期的引用文件，仅标注 日期的版本适用于本文件。 凡是不标注日期的引用文件，其最新版本适用于本文件。 中华人民共和国药典2015 年版3 部、4 部 三、基本要求 生产和检定用设施、原材料及辅料、水、器具、动物应符合“凡例”的有关要求。 四、制造 4.1 生产用细胞 4.1.1 细胞名称及来源 生产用细胞为DNA 重组技术获得的表达HBsAg 的CHO 细胞株。 4.1.2 细胞库的建立及传代 应符合“生物制品生产检定用动物细胞基质制备及检定规程”规定。 CHO 细胞株主细胞库细胞代次应不超过第21 代，工作细胞库细胞代次应不超过 第26 代，生产疫苗的最终细胞代次应不超过第33 代。 4.1.3 主细胞库及工作细胞库细胞的检定 应符合“生物制品生产检定用动物细胞基质制备及检定规程”规定。 4.1.3.1 细胞外源因子检查 细菌和真菌、支原体、细胞源病毒因子检查均应为阴性； 4.1.3.2 细胞鉴别试验 应用同工酶分析、生物化学方法、免疫学、细胞学和遗传标记物等任何方法进行 鉴别，应为典型CHO 细胞。 Q/SDHSSW006-2019 (1) 细胞染色体检查 用染色体分析法进行检测，染色体应为20 条。 (2) 目的蛋白鉴别 采用酶联免疫法检查，应证明为HBsAg 。 4.1.3.3 HBsAg 表达量 主细胞库及工作细胞库细胞HBsAg 表达量应不低于原始细胞库的表达量。 4.1.4 保存 细胞库细胞应保存于液氮中。 4.2 原液 4.2.1 细胞制备 取工作细胞库细胞，复苏培养后，经胰蛋白酶消化，置适宜条件下培养。 4.2.2 培养液 培养液为含有适量灭能新生牛血清的DMEM 液。新生牛血淸的质量应符合要求 （通则3604 ) 。 4.2.3 细胞收获 培养适宜天数后，弃去培养液，换维持液继续培养，当细胞表达 HBsAg 达到 1.0mg/L 以上时收获培养上清液。 根据细胞生长情况，可换以维持液继续培养， 进行多次收获。应按规定的收获次数进行收获。每次收获物应逐瓶进行无菌检 查。收获物应于2~8℃保存。 4.2.4 对照细胞外源病毒因子检查 依法检查 （通则3302) ，应符合规定。 4.2.5 收获物合并 来源于同一细胞批的收获物经无菌检查合格后可进行合并。 4.2.6 纯化 合并的收获物经澄淸过滤，采用柱色谱法进行纯化，脱盐，除菌过滤后即为纯化 产物。 4.2.7 纯化产物检定 按5.1 项进行。 4.2.8 纯化产物保存 Q/SDHSSW006-2019 于2 ~ 8℃保存不