叶绿素含量测定方法.docxVIP

25 1?? 25 1 ? ? 实验 14 叶绿素 a 和 b 含量的测定（分光光度法） 一、目的 学会 Chla、b 含量的测定方法，了解叶片中 Chla、b 的含量。 二、材料用具及仪器药品 菠菜叶片、721 分光光度计、天平、研钵、剪刀、容量瓶（25ml）、漏斗、滤纸、乙 醇（95%） 三、原理 叶绿素 a、b 在波长方面的最大吸收峰位于 665nm 和 649nm，同时在该波长时叶绿素 a、b 的比吸收系数 K 为已知，我们即可以根据 Lambert Beer 定律，列出浓度 C 与光密度 D 之间的关系式： D 665 =83.31Ca+18.60C b …………………………….(1) D 649 =24.54Ca+44.24 C b …………………………….(2) (1)(2)式中的 D665、D649 为叶绿素溶液在波长 665nm 和 649nm 时的光密度。 为叶绿素 a、b 的浓度、单位为每升克数。 82.04、9.27 为叶绿素 a、b 在、在波长 665nm 时的比吸收系数。 16.75、45.6 为叶绿素 a、b 在、在波长 649nm 时的比吸收系数。 解方程式(1)(2)，则得 ： CA=13.7 D665—5.76 D649………………………(3) CB=25.8 D649—7.6 D665……………………… (4) G=C A