重组体的筛选第四章.pptxVIP

第一节 重组 DNA导入受体细胞;第二节 重组体的筛选;第一节 重组 DNA导入受体细胞;;;二、受体细胞;;（一）原核生物细胞;缺欠：;枯草杆菌;（二）真菌细胞;（三）植物细胞;三、重组 DNA导入受体细胞的方法;;2、受体细胞的感受态;;（4）转化反应;;（5）转化率(transformation efficiency) ;练习; 第二节 重组体的筛选（Recombinant Screening/Selection）;筛 选;为什么要进行重组体的筛选？; ③ 自身环化的载体分子; ;①目的重组DNA分子②连接污染DNA片段的重组DNA分子 插入失活法③自身环化的载体分子 ;;一、遗传表型筛选法（Genetic phenotype selection ）;一、遗传表型筛选法;正向选择方式：;pBR322质粒载体的物理图谱;;2、插入失活法（Insertional inactivation）;问题：;（2）蓝白筛选法（Blue-white screening ） β-半乳糖苷酶显色反应/乳糖筛选（Lac screening） α-互补（α-complementation）筛选法 ;① α-互补（α-complementation）;① α-互补（α-complementation）;②蓝白筛选