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肿瘤基因治疗的基本策略和常用方法
临五1604 张湘钰 邹颖
CONTENTS
肿瘤基因治疗的基本策略和常用方法
01
肿瘤和基因治疗的基本概念
01 肿瘤
机体在各种致癌因素作用下,局部组织的某一个细胞在基因水平上失去对其生长的正常调控,导致其克隆性异常增生而形成的异常病变。学界一般将肿瘤分为良性和恶性两大类。
01 基因治疗
指将外源正常基因导入靶细胞,以纠正或补偿因基因缺陷和异常引起的疾病,以达到治疗目的,肿瘤的基因治疗是将目的基因导入靶细胞,使其在体内表达并发挥特定的功能,杀伤或抑制肿瘤细胞从而达到治疗的目的
02
肿瘤基因治疗的基本策略
01
02
03
04
采用基因打靶技术矫正突变的抑癌基因中的突变序列
将外源性的正常抑癌基因直接导入肿瘤细胞,取代突变的抑癌基因而发挥作用,以改变肿瘤细胞的恶性表型
利用基因干扰技术等抑制异常表达的癌基因或肿瘤相关基因,降低其表达活性或使其不表达
基因失活
又称基因转移,是指将外源性目的基因导入癌变细胞,通过目的基因表达产物修饰缺陷细胞,使其恢复功能或原有功能得到加强基因型修饰是应用最广泛的一个策略。
03
常用方法
1、基因干预技术
(1)反义RNA技术
如何获得反义RNA: ① 体外构建反义RNA表达载体,将其导入肿瘤
细胞并表达反义RNA
② 体外合成反义RNA,将其导入靶细胞,对表
达异常的癌细胞产生抑制效应。
1、基因干预技术
反义RNA技术在基因治疗中需解决的首要问题:
① 专一性转移问题 :如何专一性的对病灶处病变的细胞进行处
理,而不影响其它正常细胞
② 反义RNA在进入靶细胞前的降解问题:反义RNA抗RNase的
能力不强
③ 安全性问题
1、基因干预技术
受体介导反义RNA转移技术
受体介导的细胞吞噬作用:细胞膜上存在一些专一性受体是组织或器官特异的,这些受体专一性的与相应配体结合后,所形成的受体配体复合物就会在细胞膜上某些特定区域富集,通过细胞吞噬作用,实现这些配体向细胞内的转移
特点:①具有细胞、组织或器官专一性,配体
只能被一些特异的细胞吞噬
②配体进入细胞的转移效率很高
脱唾液酸血清类黏蛋白(ASGP)受体介导反义RNA转移
1、基因干预技术
反义DNA技术治疗肿瘤的三个设想:
① 封闭异常表达的癌基因
② 癌基因的异位和重排部位是反义RNA治疗的理想目标
③ 抑制肿瘤细胞耐药性,从而提高化学治疗效果
1、基因干预技术
⑵、RNA干扰技术
RNA干扰( RNA interference,RNAi ) 是指在进化过程中高度保守的,由双链RNA ( dsRNA) 诱发、同源mRNA高效特异性降解的现象。RNAi使特定基因沉默,是真核细胞中的一种转录调节机制,这种由21 ~ 23 个核苷酸长度介导的小RNA常被称为小干扰RNA( siRNA) ,其序列在真核生物进化中高度保守。将长dsRNA或短siRNA递送进入生物体细胞内均可引发RNA i,进而使特定基因表达沉默
基于RNAi的肿瘤治疗应用于临床,有两个关键问题亟需解决: 首先,如何高效向肿瘤细胞或组织递送干扰RNA; 其次,如何减少外源性siRNA引起的不良反应。
1、基因干预技术
RNAi 作用机制
①病毒基因、转座子、人工转入基因等外源基因随机整合到宿主细胞基因组内,并利用宿
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