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中医药系列文库—— 薄薄层层色色谱谱扫扫描描法法 中医药是中华传统文化重要组成部分， 在人类医学中有重要地位。 本文提供中医药知 点 “薄层色谱扫描法” 的介绍，以供大家了解。 薄薄层层色色谱谱扫扫描描法法 薄层色谱扫描法薄层色谱色斑的测定用薄层色谱扫描 仪，是用一定波长，一定强度的光束直接照射在薄层 色斑上，根据光强度的变化，从而进行定性和定量测 定。 双波长测定法是利用两束不同波长的单色元λs和λR交 替照射在色斑上，测定其吸收值差△A 。 ∵A=KC 而选择λR对色斑无吸收或吸收小 ∴AλR=0 △A=Aλs－AλR ∴△A=Aλs 吸收值差与被测样品量成 正比关系。 由于色斑对光有了吸收，在记录纸上呈现出一个峰， 根据峰面积大小，即可计算出色斑中化合物的量。 在仪器上，经过自动计算，显示出积分值。 测量方法有3种： ①透射法 单色光垂直照射在薄层表 面，并透过色斑，测量透射光的强度，以测定斑点内 被测物质的量。 ②反射法 单色光垂直照射薄层色斑后，测量其反射光 的强度，以测定色斑内物质的量。 ③荧光法 (1)直接测定法 在紫外光照射下色斑产生荧 光，直接测量色斑所发生荧光的强弱而定量。 空白的薄层部位必须设有荧光产生。 (2)荧光减退法(荧光熄灭法) 在薄层固定相中加入适当 的荧光物质，在紫外光照射下薄层产生荧光，而色斑 所在位置由于化合物吸收了紫外光，薄层上荧光物质 所接收的紫外光量减少，故荧光强度减弱，即在荧光 背底上出现暗斑。 荧光也按比例减弱。 扫描形式 ①线性扫描 用和色斑直径等长的狭缝状光束 单向扫描，称为线性扫描。 ②锯齿形扫描 用一个正方形光束(1．25mm ×1．25mm 或更小)照射色斑，或锯齿状扫描，称锯齿形扫描。 例如金银花中异绿原酸和绿原酸的薄层扫描测定，将 金银花的甲醇提取液和异绿原酸、绿原酸对照品，分 别点在硅胶薄层板上，用醋酸丁酯－甲酸－水(7 ：2 ． 5 ：2 ．5)为展开剂展开后，用薄层扫描仪扫描· 扫描条 件： 波长 λs334mm λR400mm 扫描方式 锯齿形扫描 浓 度与积分值的关系：异绿原酸的量在3μg 内，绿原酸的 量在4μg之内，浓度与积分值成线性关系。 用比较法分别求出绿原酸与异绿原酸的含量。