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不同施肥处理对萝卜风味物质影响的GC—MS分析
目前有关肥料对萝卜风味成分的影响尚未见报道。为此,研究不同施肥条件下萝卜风味成分和含量的变化,揭示肥料对萝卜风味组成的影响,对发展提高萝卜风味的技术措施有重要的理论价值和实际意义。 1材料和方法 1.1试验材料 试验于2013年8~11月在山东省农业科学院蔬菜研究所试验基地进行。供试萝卜品种为山东省农业科学院蔬菜研究所育成的鲁萝卜6号,生长期70天左右。 1.2试验设计及方法 试验共设7个处理:分别为不施肥对照(CK);(1)氮肥;(2)氮肥+钾肥;(3)缓释肥;(4)有机肥;(5)有机肥+硼肥;(6)有机肥+钙肥,养分含量见表1。各处理氮用量相等,氮肥用量为22.5 g/m2,钾肥13.4 g/m2,硼肥1.5 g/m2,钙肥13.4 g/m2。有机肥施用方法为基施,其它肥料均为追施。8月22日播种,9月20日开始取样,隔8天取样一次, 至采收期共取样5次。田间管理同常规生产。采样时各处理选择大小、成熟度一致的肉质根5个, 取萝卜根部上端同位置样品放于超低温冰箱待测。 1.3定性定量分析方法 定性分析:色谱分离后,质谱扫描每个色谱峰得到质谱图,所得质谱信息经计算机用标准NIST08质谱图数据库确定风味物质组分种类。 定量分析: 采用内标法进行定量,选择3-壬酮为内标,其浓度为0.4 g/L,体积为5 mu;L。计算公式参照陈美霞等[5]的方法。 样品处理条件:每份样品放入打浆机中打成匀浆,称取7.00 g于10 mL顶空瓶中,在样品底部加入内标物3-壬酮,用锡箔纸封口,采样台预热温度40℃,插入SPME顶空取样30 min,将萃取头插入GC进样口,250℃解吸3 min后进样分析。 色谱条件:气相色谱柱为RET-5(30 m0.32 mm 0.25 mu;m)弹性石英纤维毛细管柱;升温程序:35℃保持3 min,以3℃/min升至45℃,再以6℃/min升至130℃,最后以8℃/min升至230℃,保持8 min;载气(He)流速2.54 mL/min,压力2.4 kPa,进样方式为不分流。 质谱条件:电子轰击(EI)离子源;电子能量70 eV;接口温度250℃;离子源温度200℃;全扫描模式,扫描范围:45~450 m/z 。 1.4萝卜辣素的测定方法 称取萝卜样品20 g,加同等体积蒸馏水制成匀浆,准确称取10 g匀浆(合5 g样品),用无水乙醇移入50 mL容量瓶中,用无水乙醇定容摇匀过滤。取滤液35 mL,放入50 mL容量瓶中,加硝酸银标准溶液5 mL,边加边摇,放置至沉淀下沉,加水定容摇匀,12 000 r/m离心10 min。取滤液40 mL于100 mL三角瓶中,加浓硝酸5 mL,硫酸铁铵溶液1 mL,用硫氰酸铵标准溶液滴定至微橙红色。根据消耗的体积数计算萝卜辣素[6]。 2结果与分析 2.1不同施肥处理萝卜风味成分构成 不同施肥处理的萝卜风味成分GC/MS总离子图见图1。各组分经计算机检索同时与NIST library谱库检索,共检测出14种风味物质(表2),主要包括异硫氰酸酯类、醇类、醚类、醛类、酮类及烷烯烃类六大类物质,其中异硫氰酸酯类7种、醇类3种、醚类1种、醛类1种、酮类1种、烷烃类1种。 2.2不同施肥处理萝卜主要风味成分比较 2.2.1异硫氰酸酯类7个处理的萝卜风味物质中含量最高的均是4-甲硫基-3-丁烯异硫氰酸酯,但不同施肥处理含量差别较大。施用氮肥的处理1和施用有机肥+钙肥的处理6含量较高,分别为30.446 mu;g/g和25.736 mu;g/g,含量较低的是处理2和处理5,分别为14.678 mu;g/g和13.915 mu;g/g,处理3和处理4与CK的含量差异不大。 7个处理共有的异硫氰酸酯类物质还有异硫氰酸丁酯、异硫氰酸己酯、异硫氰酸戊酯、4-甲基异硫氰酸戊酯,四种风味物质在处理1和处理6中含量最高,各处理的异硫氰酸己酯含量差别类似于4-甲硫基-3-丁烯异硫氰酸酯;异硫氰酸丁酯含量较低的是处理2、处理3、处理4,处理5与CK的含量差异不大。 2.2.2醇类2,3-二甲基-3-己醇是仅次于4-甲硫基-3-丁烯异硫氰酸酯的第二大风味物质,处理1的含量最高,处理3、处理6与CK含量差异不大,其余3个处理含量比较低;甲硫醇在各处理的含量变化类似2,3二甲基-3-己醇。 2.2.3醚类二甲基二硫醚风味物质在处理1和处理6的含量较高,其次是处理3、处理4,这4个处理都比CK的含量高,处理2、处理5
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