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不同提取方法对三种茶中黄酮含量测定的问题和策略 黄酮类化合物泛指以C6-C3-C6为基本碳架的一系列化合物[1]，在植物中分布广泛，其在植物体内大部分与糖结合成苷类，小部分以游离态（苷元）的形式存在[2]。黄酮类化合物是一种重要的生理活性物质，具有较强的生物活性和药理活性[3]，在各种中草药中含量比较丰富，因此备受关注。 　　我国茶区辽阔，茶产量逐年增加且品种繁多[4]。茶叶中含有大量的生物活性物质，黄酮醇及一些苷类物质是茶叶中重要的[() 专业提供专业和发表教育论文的服务,欢迎光临]活性成分，具有提神醒脑、清热解暑、消食化痰、生津止渴、降火明目、止痢除湿等功效[5]，此外长期喝茶对抗辐射、抗心脑血管疾病和抗癌等具有一定的作用。目前，对于茶叶中黄酮类化合物的研究比较多，但大多集中在单一茶叶中黄酮类物质的提取方法的工艺研究上，对于其含量的测定及不同品种黄酮类化合物含量的比较鲜有报道。本研究采用超声波提取法和常压提取法分别对绿茶（江西婺源）、红茶（河南信阳）、绞股蓝茶（神农架）在不同条件下进行黄酮提取，研究这3种茶叶中黄酮最佳提取方式并对其黄酮含量进行比较，以期为茶叶研究提取黄酮类化合物及购买茶叶提供参考。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验材料 　　2010年收集江西婺源产绿茶（N 25deg;15prime;，E 117deg;50prime;）、河南信阳产红茶（N 31deg;46prime;，E 114deg;01prime;）和神农架产绞股蓝茶（N 31deg;46prime;，E 110deg;39prime;）进行试验。 　　1.2 试验方法 　　1.2.1 标准曲线的绘制 称取2.8 mg芦丁标准品（购于中国药品生物制品检定所）定容至25 mL容量瓶中，配制成浓度为0.102 7 mg/mL芦丁标准溶液，分别量取芦丁标准溶液 0、1.0、2.0、3.0、4.0、6.0 mL于 10 mL容量瓶中，用0.05 mol/L三氯化铝-乙醇溶液（1.33 g三氯化铝溶于无水乙醇中，定容至1.00 mL）定容至10 mL，混匀，静置10 min。以三氯化铝-乙醇溶液为空白于400 nm波长处测定吸光度值。以芦丁浓度为横坐标，OD400 nm值为纵坐标，绘制标准曲线。 　　1.2.2 总黄酮提取方法 采用超声波提取法和常压提取法提取总黄酮。称取0.5 g不同品种茶叶于50 mL锥形瓶中，加入10 mL不同浓度乙醇，封口，分别置于恒温水浴锅和超声波清洗仪一定时间后取出，离心后过滤，滤液用蒸馏水定容至25 mL，取1 mL提取液，加AlCl3显色剂定容至10 mL，摇匀，静置10 min后，于400 nm波长处测定吸光度值，根据标准曲线换算出各茶叶中黄酮的含量。以上试验均重复2次。 　　提取过程中采用不同体积分数乙醇、提取温度、提取时间进行组合（表1），以茶叶中黄酮含量为考察指标，分析最适宜的提取方法。 　　1.3 数据分析 　　采用DPS分析软件进行最小差异法分析。 　　2 结果与分析 　　2.1 超声波不同提取条件下茶叶中黄酮含量的比较 　　由表1可以看出，在超声波方法下提取绿茶中黄酮的较适宜条件为70%乙醇、60 ℃、60 min和70%乙醇、60 ℃、80 min，这2种条件下得到的绿茶中黄酮的含量分别为4.133 8、4.152 4 mg/g，二者差异不显著，因而确定超声波条件下绿茶中黄酮的最佳提取条件为70%乙醇、60 ℃、60 min。在不添加乙醇、80 ℃、40 min条件下提取的绿茶中黄酮含量最低，为2.573 0 mg/g。且在不添加乙醇的条件下，提取的绿茶中黄酮含量均较低。 　　由表1可知，在超声波方法下提取的红茶中黄酮的最佳条件为40%乙醇、70 ℃、80 min，得到的黄酮含量为5.493 3 mg/g。但此条件下的黄酮含量与40%乙醇、70 ℃、60 min条件下的黄酮含量差异不显著，因此，选定超声波提取[() 专业提供专业和发表教育论文的服务,欢迎光临]红茶中黄酮的最佳条件为40%乙醇、70 ℃、60 min。在不添加乙醇、60 ℃、40 min条件下提取的黄酮含量最低，为2.591 5 mg/g。 　　由表1可知，绞股蓝茶中黄酮在超声波方法下提取的较适宜条件为70%乙醇、60 ℃、80 min和70%乙醇、70 ℃、80 min，得到的黄酮含量分别为6.349 2、6.403 0 mg/g。但这2个条件下提取的黄酮含量与70%乙醇60 ℃ 60 min、70%乙醇70 ℃ 60 min、70%乙醇80 ℃ 40 min、70%乙醇70 ℃ 40 min、70%乙醇80 ℃ 80