发酵工程笔记.docVIP

（来自讲义） 致死温度 杀死微生物的极限温度 致死时间 在致死温度下，杀死全部微生物所需的时间 微生物的热阻 微生物在某一特定条件（主要是温度和加热方式）下的致死时间 实罐灭菌 培养基置于发酵罐中用蒸汽加热，达到预定灭菌温度后，维持一段时间，再冷却道发酵温度，然后接种发酵。 微生物的特点 体积小、面积大，吸收快、转化快，生长旺、繁殖快，易变异、适应性强，种类多、分布广等五大特性。 菌种分离的一般过程 土样的采取→ 预处理→ 培养→ 菌落的选择→ 产品的鉴定 目的：高效地获取一株高产目的产物的微生物 生物热（Q生物） 在发酵过程中，菌体不断利用培养基中的营养物质，将其分解氧化而产生的能量，其中一部分用于合成高能化合物（如ATP）提供细胞合成和代谢产物合成需要的能量，其余一部分以热的形式散发出来，这散发出来的热就叫生物热。 （来自PPT） 第一章 绪论 发酵工程：利用微生物的生命活动进行物质加工的过程。 第二章 生产菌种的筛选 新种分离筛选的步骤 定方案：首先要查阅资料，了解所需菌种的生长培养特性。 采样：有针对性地采集样品，以采集土壤为主。 增殖：人为地通过控制养分或培养条件，使所需菌种增殖培养后，在数量上占优势。 分离：利用分离技术得到纯种。 发酵性能测定：进行生产性能测定。这些特性包括形态、培养特征、营养要求、生理生化特性、发酵周期、产品品种和产量、耐受最高温度、生长和发酵最适温度、最适pH值、提取工艺等。 采土方式：在选好适当地点后，用小铲子除去表土，取离地面5-15cm处的土约10g，盛入清洁的牛皮纸袋或塑料袋中，扎好，标记，记录采样时间、地点、环境条件等，以备查考。为了使土样中微生物的数量和类型尽少变化，宜将样品逐步分批寄回，以便及时分离。 采样注意事项 采样时应尽可能保持相对无菌； 所采集的样本必须具有某种代表性； 采好的样必须完整地标上样本的种类及采集日期、地点以及采集地点的地理、生态参数等； 应充分考虑采样的季节性和时间因素，因为真正的原地菌群的出现可能是短暂的 采好的样应及时处理，暂不能处理的也应贮存于4℃下，但贮存时间不宜过长。这是因为一旦采样结束，试样中的微生物群体就脱离了原来的生态环境，其内部生态环境就会发生变化，微生物群体之间就会出现消长。 水样采集方法 用于细菌检测的水样应收集于100ml干净、灭菌的广口塑料或玻璃瓶中。 由于表层水中含有泥沙，故在采样时应在较深的静水层中采集水样。 方法是：握住采样瓶底浸入水中30-50cm处，然后瓶口朝下打开瓶盖，让水样进入。如果有急流存在的话，应直接将瓶口反向于急流。采集瓶从水中取出时应迅速并带有较大的弧度。水样不应装满采样瓶。所有水样都应在24h之内迅速进行检测，或者4℃下贮存。 发酵工程所利用微生物的特点 对周围环境的温度、压强、渗透压、酸碱度等条件有极大的适应能力 有极强的消化能力 有极强的繁殖能力 发酵工程三要素 生产菌种的性能（即高产菌株）； 科学的生产管理（包括补料发酵等）； 先进的生产设备。 一般筛选菌种步骤如下 标本采集 → 材料预处理 → 富集 → 菌种分离初筛 → 性能测定 → 菌种的应用与保藏。 第三章 优良菌株的选育 一个优良的生产菌株应具备以下的基本特性： 发酵周期短，代谢能力高：在不增加生产投资的前提下能大幅度提高企业的产量； 附产物少：发酵过程中，与目标产品近似的附产物少，这样既能提高转化率，又能减轻提取分离的难度； 繁殖能力强：有较强的生长速率，产孢菌株应有较强的产孢子能力。这样既能缩短生产周期，又可减少污染。 利用底物原料（如碳、氮源）广泛：对原料波动的敏感性小，使发酵可用价兼，来源广泛的原料； 原料转化率高：能高效地将原料转化为产品，以提高市场竞争力； 对添加的前体物质有耐受能力，不以该物为碳源利用； 在发酵过程中产生泡沫少，这样可提高发酵的装填系数，达到提高产量，降低成本的目的； 具有抗噬菌体感染能力； 遗传特性稳定，以减少复壮次数。 自然选育（spontaneous mutation），自然选育是从自然界筛选非人工诱变产生的生产菌株。一般认为自然界菌株变异由两种原因引起，即多因素低剂量的诱变效应和互变异构现象： 多因素低剂量诱变效应：指低剂量的宇宙射线，各种短波辐射，低剂量的诱变物质作用引起的突变。 互变异构效应：指DNA复制时，四种碱基第六位上的酮基或氨基的瞬间变构而引起的碱基错配。这种几率在自然界具统计在1x10。 自然变异的菌株会导致两种不同结果：一是导致产品产量或质量下降；二是对生产有益的突变。因此生产上要经常进行菌种自然选育，从而淘汰退化的，选出优良的生产菌种。自然选育是用平板稀释法，分离出单菌落，再测试菌种的生产能力，从而选出高水平菌株。它是一种简单易行的选育方法，可以达到纯化菌种、防止退化，