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发酵罐接种操作
3.0 内容:3.1 接种前准备
3.1.1将温度降至25℃以下的发酵罐移至接种室,接通进气管道,先调整进气压力为0.06Mpa,开启进气阀门后打开发酵罐排气阀,保持罐内正压
3.1.2 将接种工具和摇瓶检测用试管放在层流罩下一侧平台架上;环境检测用平板放在检测专用平台上;
3.1.3 将准备好的灭火用水、湿毛巾、酒精放入接种室的回风区;
3.1.4 关闭接种室门,开启层流罩开关和紫光灯开关,30min后关闭紫光灯后开始接种。
3.1.5 摇瓶使用前挑选:摇瓶摇瓶在使用前由技术部挑选是否为合格菌种,并将所用摇瓶菌丝状态填写在《摇瓶接种及使用记录》上。
3.1.6 需放在磁力搅拌器上搅拌10分钟,待菌球打碎均匀后,方可接种,品保部每瓶进行复核。
3.2 接种
3.2.1 接种人员带接种用手套,使用75%酒精+新洁尔灭溶液手部喷雾消毒;
3.2.2 将准备好的摇瓶使用75%酒精+新洁尔灭溶液表面喷雾消毒,经接种孔,放入层流罩内待接发酵罐上;
3.2.3 在检测专用架上打开环境检测平板;
3.2.4 除去安全阀上的保险丝,将95%的酒精棉均匀放入发酵罐接种口下的凹槽中,用火焰喷枪引燃;
3.2.5充分灼烧发酵罐的盖面部分,并将灼烧后的接种工具并放于
3.2.6 用火焰喷枪对待用接种摇瓶瓶口及瓶口以下10cm范围灼烧消毒,灼烧棉塞,灼烧过程中旋转摇瓶,使其灼烧均匀充分
3.2.7调整进气阀压力为0.00Mpa,待排气口出气微弱后,用工具打开接种口的保护阀,迅速调整进气阀压力为0.06Mpa,用接种工具挑起接种口罐盖,并放于发酵罐盖面火焰附近。
3.2.8在喷枪的火焰保护下,用坩埚钳拔去摇瓶棉塞扔至灭火水桶内,并在火焰保护下迅速将摇瓶菌种倾倒入发酵罐,留20-30ml样品检测PH值备用;
3.2.10挑取发酵罐盖盖于接种口上,使用工具锁紧保护;
3.3 摇瓶检测
3.3.1将灼烧后的
3.3.2手持检测用试管,在酒精火焰上对试管口进行灼烧,待试管口内壁干燥后,保持试管口在火焰上方,另一只手指缝拔取棉塞,用接种钩蘸取少量样品,在试管斜面培养基上划线,并迅速塞上棉塞。
3.3.3 收取沉降菌检测平板,两天后由品保部记录结果;
3.3.4 用湿毛巾熄灭凹槽内的火焰
3.3.5 关闭发酵罐出气阀门,待罐压回升至0.06 Mpa
3.3.6 将接种后的发酵罐移至对应编号位置,连接进气管,先调整0.1 Mpa进气压力,打开进气阀,后打开排气阀,
3.3.7 填写《发酵罐状态卡》并悬挂于发酵罐上
3.4 接种结束
3.4
3.4.2 对摇瓶余留样液进行PH值检测,并
3.4.3
3.4.4 清洁和整理接种室,
3.4.5
3.4.6 检查
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