宁夏《土壤过氧化氢酶的测定方法》.pdf

T/NAIA XXXX—2020 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009 《标准化工作导则 第 1部分：标准的结构和编写》规定编写。 本标准由宁夏昊标检测服务研究院 （有限公司）提出。 本标准由宁夏化学分析测试协会归口。 本标准起草单位：宁夏昊标检测服务研究院 （有限公司）、宁夏大学、宁夏农林科学院荒漠 所、银川能源学院、宁夏化学分析测试协会。 本标准主要起草人：任亚丽、白玲、张亮亮、卜姣姣、杨洁、季波、鲁静、张小飞、刘娜娜。 本标准于2020年XX月XX 日首次发布。 T/NAIA XXXX—2020 土壤过氧化氢酶的测定 （高锰酸钾滴定法） 1 范围 本标准规定了土壤过氧化氢酶的测定方法 （高锰酸钾滴定法）。 本标准适用于各类土壤过氧化氢酶的测定 （高锰酸钾滴定法）。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的应用文件，仅注日期的版本适 用于本文件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本 （包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 601 化学试剂 标准滴定溶液的制备 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 NY/T 1121.1 土壤检测 第一部分：土壤样品的采集、处理和贮存 3原理 在4 ℃条件下，土壤过氧化氢酶酶促分解过氧化氢，用高锰酸钾标准溶液滴定反应剩 余过氧化氢，所消耗的高锰酸钾标准溶液体积数来表示过氧化氢酶的活性。 4 试剂和溶液 除非另有说明外，本方法均使用符合国家标准的分析纯试剂，分析用水为GB/T 6682 规定的三级水。 4.1 甲苯 （CH）。 7 8 4.2 浓硫酸 （HSO ）。 2 4 4.3 过氧化氢 （HO ）。 2 2 4.4 高锰酸钾 （KMnO）。2 4 4.5 硫酸溶液 （0.2 mol/L） 准确移取5.43mL浓硫酸，缓缓注入400mL水中，冷却后用水定容至500mL。置于4 ℃ 冰箱贮存。 4.6 高锰酸钾标准溶液c （1/5 KMnO） 0.1 mol/L2 4 称取3.3g （精确至0.0001g）高锰酸钾，溶于1050mL 水中，缓缓煮沸15min，冷却， 于暗处放置两周，过滤。贮存于棕色瓶中，并按照GB/T 601对其进行标定。 4.7 过氧化氢水溶液 （3 %） 准确量取30% 过氧化氢溶液25mL，用水定容至250mL，配成3%过氧化氢水溶液，置 T/NAIA XXXX—2020 于4 ℃冰箱贮存，临用时用0.1mol/L 高锰酸钾标准溶液 （4.6）标定。准确吸取1.00 mL 3 %过氧化氢溶液于50 mL三角瓶中，加入5 mL水，5 mL 0.2 mol/L 的硫酸溶液 （4.5）， 用0.1 mol/L 的高锰酸钾标准溶液 （4.6）标定，所消耗的体积数为16.51 mL。 备注：由于不同批次的过氧化氢浓度存在差异，因此需要每次滴定前标定，若消耗高锰 酸钾标准溶液 （4.6）的体积大于或小于16.51mL时，说明过氧化氢的实际浓度大于或小于 3 %，这种情况就要重新配制过氧化氢溶液重新标定，直到过氧化氢实际浓度等于3 %时才 能使用。 5 仪器设备 5.1 电子天平:感量0.0001g。 5.2 冰箱 （4 ℃）。 5.3 酸式滴定管。 6 操作步骤 分别称取5 g （精确至0.0001g）土壤 （如含量高可适当减少称样量）样品于具塞三角 瓶中（用不加土样的作空白对照），加入0.5mL 甲苯（4.1），摇匀，于4 ℃冰箱中放置30min。 取出，立刻加入25mL4 ℃冰箱贮存的3%过氧化氢水溶液（4.7），充分混匀后，再置于4 ℃ 冰箱中放置 1 h。取出，迅速加入25 mL贮存于4 ℃冰箱的0.2 mol/L 硫酸溶液 （4.5）， 摇匀后过滤。准确吸取 1.00 mL滤液于