western-blot条带分析及解决方法剖析.pdfVIP

现象 原因 解决 反影 ( 白色条带 , 黑色背景 ) 1 HRP过高 ( 背景较高 ) 至少成倍稀释一抗 / 二抗 ( 可 4~10 倍 )* 注 1 显影后膜上条带处变为黄色 2 HRP 过高 ( 敏感性太高 ) 至少成倍稀释一抗 / 二抗 ( 可 4~10 倍 )* 注 2 信号弱或无 3 HRP 过高引起底物迅速耗竭 至少成倍稀释一抗 / 二抗 ( 可 4~10 倍 )* 注 3 4 抗体 - 抗原系统敏感性过低 提高抗体浓度 / 蛋白上样量 * 注 4 5 转膜不充分 / 过