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ABO血型鉴定正反定型试验方法
试剂和材料：
单克隆抗A、抗B试剂（由试剂厂家提供）
显微镜、载玻片
A型、B型红细胞（本实验室制备的5%混悬液）
EDTA抗凝的待测红细胞全血
竹签
方法（玻片法）：
正定型：
在一块干净的玻片上，间隔一定距离做好标记，分别滴一滴抗A和抗B试剂；
在每滴试剂中加一滴待测红细胞全血；
用竹签混匀试剂和红细胞，并使混合物直径＞15mm；
轻摇玻片，两分钟内观察结果，必要时可以在低倍镜下观察；
判读、解释并记录反应结果。
反定型：
在玻片上间隔一定距离标明Ac和Bc字样。分别滴加5%的A型红细胞悬液、B型红细胞悬液各一滴；
在玻片每滴红细胞悬液上滴加待测血清各一滴；
混匀（同正定型）；
轻摇玻片，两分钟内观察结果，必要时可以在低倍镜下观察；
判读、解释并记录反应结果。
结合正反定型反应结果、判定血型，见表1
表1 ABO血型正反定型试验结果判定
正定型
反定型
血型
抗体试剂+红细胞标本
红细胞试剂+血清标本
抗A
抗B
A细胞
B细胞
+
O
O
+
A
O
+
+
O
B
O
O
+
+
O
+
+
O
O
AB
附注：
表中“O”表示无凝集，“+”表示凝集，一般都是3-4个+的强凝集反应；
2分钟后红细胞仍呈均匀混悬状态是阴性反应；
若得到弱的或可凝集反应结果，该标本应用试管法重新试验；
由于新生儿在出生4~6个月内，血浆中的ABO抗体活动太弱，并且含有来自母亲的抗体，故新生儿血型只能由检测红细胞抗原的正定型来测定其ABO血型；
做正定型时，还可加一抗A、B血清（O型人血清），以检测ABO弱抗原；做反定型时可以加试一O型红细胞，借以证实是否有不规则抗体的存在。
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